花椰菜游離小孢子培養(yǎng)及再生植株研究.pdf

1、以17個(gè)花椰菜品種為試材，進(jìn)行游離小孢子培養(yǎng)，對(duì)花椰菜小孢子胚狀體誘導(dǎo)的影響因素、提高小孢子植株獲得率的方法、小孢子植株的繼代培養(yǎng)、生根及移栽技術(shù)進(jìn)行了研究，旨在建立起完善的植株再生體系，研究結(jié)果如下。 1.在小孢子胚胎發(fā)生能力方面，不同基因型材料之間成胚能力存在很大差異。在試驗(yàn)所用的17個(gè)基因型花椰菜材料中，有6個(gè)獲得了胚狀體，成功率達(dá)35.3％。其中魁首(BARKHA)、白馬王子50天產(chǎn)胚量最高，平均每30個(gè)花蕾產(chǎn)量分別達(dá)1

2、80、169個(gè)胚。 2.適合花椰菜小孢子培養(yǎng)的蔗糖濃度為13％，隨著蔗糖濃度的增大，小孢子出胚率呈下降趨勢(shì)；適合花椰菜游離小孢子培養(yǎng)的活性碳濃度為500mgL-1，變化趨勢(shì)為隨著活性碳的濃度增加，出胚率增加，當(dāng)活性碳濃度增加到一定的數(shù)值時(shí)，出胚率隨著活性碳濃度的增加而下降；培養(yǎng)基添加的AgNO3濃度為60mgL-1時(shí)，小孢子的出胚率最高，達(dá)到244個(gè)/30個(gè)花蕾。 3.小孢子發(fā)育程度與花蕾大小的關(guān)系因品種而異，魁首(BA

3、RKHA)、白馬王子50天適宜進(jìn)行小孢子培養(yǎng)的花蕾大小為花蕾長(zhǎng)2.7～3.19mm。不同基因型的小孢子發(fā)育同步性差異不大。適合花椰菜游離小孢子培養(yǎng)的小孢子發(fā)育時(shí)期為單核靠邊期至雙核早期。 4.在培養(yǎng)基中添加激素可以提高花椰菜小孢子胚的誘導(dǎo)效率。培養(yǎng)基中添加一定濃度的6-BA和NAA，可以很大程度地提高成胚率，適宜濃度為0.05mg.L-1的6-BA和0.1mg.L1的NAA。 5.在4℃下進(jìn)行0h(對(duì)照)及24～120h

4、不同時(shí)間冷激處理，采用相同的小孢子分離方法，結(jié)果表明低溫處理能提高花椰菜胚狀體的產(chǎn)量，適宜時(shí)間為24h，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，胚產(chǎn)量下降；33℃高溫?zé)峒ぬ幚?4h，能夠有效地提高花椰菜游離小孢子出胚率，在此條件下泰國(guó)耐熱A50天的出胚率達(dá)到了87個(gè)胚/30個(gè)花蕾； 6.胚狀體成苗率與胚胎發(fā)育程度密切相關(guān)，胚胎越大越容易成苗。萌發(fā)胚成苗率最高，可達(dá)78.12％，子葉胚成苗率可達(dá)65.51％；發(fā)育早期的胚胎心形胚和球形胚難以成苗。