甘藍類蔬菜游離小孢子培養(yǎng)胚發(fā)生及其再生植株的研究.pdf

1、游離小孢子培養(yǎng)技術(shù)在作物遺傳育種上具有重要的應(yīng)用價值，通過該技術(shù)一方面可以快速獲得純合體，縮短育種年限，提高育種效率。另一方面，由小孢子培養(yǎng)獲得的胚狀體和再生植株還可以廣泛的應(yīng)用于構(gòu)建遺傳圖譜、基因定位、轉(zhuǎn)基因育種以及染色體工程等等。 胚胎發(fā)生能力和再生植株轉(zhuǎn)化率是游離小孢子培養(yǎng)技術(shù)的關(guān)鍵問題。本試驗選用60個結(jié)球甘藍品種，6個花椰菜品種，3個抱子甘藍品種和2個羽衣甘藍品種，分別進行游離小孢子培養(yǎng)，篩選出16份有胚胎發(fā)生的材料；

2、選用其中胚胎發(fā)生能力較強的材料進一步研究影響甘藍類蔬菜小孢子胚胎發(fā)生能力的因素，統(tǒng)計植株再生率，并對獲得的再生植株進行倍性檢測和SRAP鑒定。結(jié)果如下 1.適于甘藍類蔬菜小孢子胚胎發(fā)生的小孢子發(fā)育階段位于單核晚期至雙核期，在結(jié)球甘藍培養(yǎng)過程中雙核期小孢子數(shù)目比例在50﹪左右為好。 2.培養(yǎng)基中蔗糖濃度為13﹪時可以誘導(dǎo)較多的基因型產(chǎn)生胚狀體，個別結(jié)球甘藍材料需要更高的蔗糖濃度。采用蔗糖濃度先高后低的稀釋培養(yǎng)法能夠提高啟動

3、對稱分裂小孢子的數(shù)量和胚狀體的產(chǎn)量。NAA(0.05mg/L)加BA(0.1mg/L)的激素組合有利于小孢子的胚胎發(fā)生?；钚蕴繉ε咛グl(fā)生的促進作用極其顯著。 3.誘導(dǎo)小孢子核第一次對稱分裂的溫度和時間為33℃24h。 4小孢子胚轉(zhuǎn)化再生植株率平均達到65.53﹪，不同基因型的植株再生率變化范圍在54.8﹪-70.3﹪之間。 5.運用形態(tài)學(xué)、細胞生物學(xué)方法檢測再生植株的倍性，發(fā)現(xiàn)甘藍類蔬菜具有較高的自然加倍能力，再