植物乳桿菌聯(lián)合辣椒素降大鼠血脂及改善腸道環(huán)境的研究.pdf

1、目前，動脈粥樣硬化和心腦血管疾病已成為我國發(fā)病率和死亡率第一的慢性疾病，而高膽固醇血癥是誘發(fā)動脈粥樣硬化和心腦血管疾病公認的主要危害因素，已引起全社會各界學者們的廣泛關注。辣椒素是辣椒的主要活性物質，具有多種生理功效。關于辣椒素能有效降低機體內膽固醇含量的功效在國內外已有大量研究報道證實，但關于辣椒素對腸道健康的影響報道卻較少。有研究報道，辣椒素對腸道健康有重要作用，能參與胃腸道消化液的分泌，促進胃腸蠕動。但也有研究發(fā)現(xiàn)，給健康人灌胃辣

2、椒素會即刻引起腹部痙攣和疼痛，辣椒素還會引起腸道菌群失衡，減少有益菌數(shù)量而增加有害菌數(shù)量。植物乳桿菌作為一種益生菌，其降機體血清膽固醇及維護腸道環(huán)境健康的功效已得到國內外學界普遍認可。因此，本實驗通過動物實驗分別研究辣椒素與植物乳桿菌單獨或結合降膽固醇的效果及其機理，這將對預防高膽固醇血癥及其并發(fā)癥提供理論依據。本研究的內容分為三個部分，主要研究結果如下：
　　1.植物乳桿菌聯(lián)合辣椒素對卵巢切除大鼠膽固醇代謝及其機理的研究

3、　　40只雌性老鼠被隨機分為sham組（n=8）和OVX組（n=32）。sham組接受卵巢偽切除操作（1 mL/100 g BW生理鹽水，無辣椒素飼料），和OVX組雙側卵巢切除。待老鼠恢復后，將32只OVX組大鼠隨機分為空白組（1 mL/100 g BW生理鹽水，無辣椒素飼料），辣椒素組（1 mL/100 g BW生理鹽水，喂養(yǎng)含0.08 g/k g辣椒素的飼料），植物乳桿菌組（1 mL2×109 c fu/mL/100 g BW L.

4、P.細菌液體，無辣椒素飼料），和結合組（1 mL2×109 c fu/mL/100 g BW L.P.細菌液體，喂養(yǎng)含0.08 g/k g辣椒素的飼料）組，實驗周期為6周。通過研究辣椒素與植物乳桿菌單獨或結合對血漿TC、TG、HDL-C、LDL-C，肝脂含量，糞便中總膽汁酸含量、中性固醇含量，小腸內容物中總膽汁酸含量、肝臟的組織形態(tài)、肝臟和回腸相關基因及其蛋白等指標的影響，來觀察辣椒素與植物乳桿菌對卵巢切除大鼠膽固醇代謝的影響。

5、　　研究結果：雙側卵巢切手術能顯著增加大鼠血漿中TC、TG濃度和肝臟總膽固醇濃度，另外，肝臟組織中脂肪滴積聚明顯。然而，卵巢切除大鼠中，在飼料中添加辣椒素或灌胃植物乳桿菌菌液均能降低大鼠血漿TC、L DLC、T G和肝臟膽固醇濃度，阻止大鼠肝臟組織中脂肪滴的積聚。其中，單獨喂養(yǎng)辣椒素分別使大鼠血漿TC、TG含量顯著降低22.81％、8.93%（P＜0.05），肝臟膽固醇含量降低28.02%；單獨灌胃植物乳桿菌大鼠血漿TC、TG和肝臟膽固

6、醇含量均有降低但無顯著性變化（P＞0.05）；而二者結合同時作用時，大鼠血漿TC、TG含量顯著降低24.45%，21.43%，且肝臟組織中脂肪滴堆積明顯減輕。這些數(shù)據表明，辣椒素與植物乳桿菌結合阻止由雌激素缺乏引發(fā)的高膽固醇血癥效果優(yōu)于單獨喂養(yǎng)辣椒素或單獨灌胃植物乳桿菌。辣椒素與植物乳桿菌結合能顯著上調卵巢切除大鼠肝臟中CYP7A1 mRNA及蛋白的表達，顯著下調HMG-CoA還原酶、FXR和回腸中ASBT和IBABPmRNA及蛋白及的

7、表達，并且能增加小腸內容和糞便中總膽汁酸、糞便中中性固醇的含量（P＜0.05）。辣椒素與植物乳桿菌結合降低機體膽固醇的機制可能是：通過調控相關基因促進肝臟中膽固醇合成膽汁酸，同時促進膽汁酸和中性固醇通過糞便排泄。
　　2.辣椒素與植物乳桿菌在體外結合降膽固醇的效果
　　為探討辣椒素與植物乳桿菌結合降膽固醇的機理，采用體外培養(yǎng)方法進行試驗。植物乳桿菌菌種活化后，選出降膽固醇率最大的植物乳桿菌添加量，用最大的植物乳桿菌添加量找出

8、其耐受辣椒素的最大辣椒素濃度，在植物乳桿菌耐受辣椒素的濃度范圍內研究不同濃度水平的辣椒素溶液與植物乳桿菌結合對膽酸釋放、膽鹽與膽固醇共沉淀、菌體細胞吸收同化和細胞膜吸附膽固醇能力的影響。
　　研究結果：植物乳桿菌耐受辣椒素的最高辣椒素質量濃度為0.1 mg/mL。在植物乳桿菌能耐受辣椒素的濃度范圍內，隨著培養(yǎng)基中辣椒素濃度的不斷增大，植物乳桿菌釋放膽酸的能力下降，對膽固醇沉淀量和菌體細胞吸收量均降低，但細胞膜吸附膽固醇量卻增加。說

9、明，辣椒素與植物乳桿菌體外結合，辣椒素抑制了植物乳桿菌降膽固醇的能力，也從側面證實，辣椒素與植物乳桿菌在動物體內聯(lián)合降膽固醇機理不是通過辣椒素與植物乳桿菌相互作用來實現(xiàn)的。
　　3.植物乳桿菌與辣椒素對卵巢切除大鼠腸道環(huán)境的影響
　　主要探討辣椒素與植物乳桿菌對卵巢切除大鼠腸道環(huán)境的影響，分析其與降大鼠膽固醇的相關性。實驗方法同1.。
　　研究結果：與sham組相比，雙側卵巢切除使大鼠盲腸pH值、游離氨含量顯著增加，腸

10、道組織絨毛長度、隱窩深度顯著減小。在卵巢切除大鼠中，單獨喂養(yǎng)辣椒素顯著增加大鼠盲腸內游離氨含量，同時，一定程度損傷腸道壁組織，使組織絨毛長度變短且稀疏；單獨灌胃植物乳桿菌，或辣椒素與植物乳桿菌結合均能顯著增加大鼠盲腸總短鏈脂肪酸含量，顯著降低pH值，一定程度減少游離氨含量和含水量。單獨灌胃植物乳桿菌使大鼠腸道組織絨毛長度和隱窩深度顯著增加。卵巢切除手術降低了大鼠盲腸腸道菌群的多樣性，增大了擬桿菌門和厚壁菌門的比率，減少了有益群菌的含量。