mba論文匹諾塞林生物合成相關(guān)基因的克隆、功能鑒定及工程菌的構(gòu)建pdf

1、碩士學位論文學校代碼： 1 0 0 2 3學 號：$ 2 0 1 2 0 0 8 8 0 2 1匹諾塞林生物合成相關(guān)基因的克隆、功能鑒定及工程菌的構(gòu)建C l o n i n ga n dC h a r a c t e r i z a t i o no fG e n e s i nt h eb i o s y n t h e t i c p a t h w a yo f P i n o c e m b r i na n dC o n s

2、t r u c t i o no f E n g i n e e r e dE s c h e r i c h i ac o l if o r ( 2 國一P i n o c e m b r i n所 院 ： 藥物研究所姓 名 ： 郭磊指導教師： 孔建強副研究員導師小組： 孔建強副研究員王偉研究員程克棣研究員學科專業(yè)： 生藥學研究方向： 天然藥物合成生物學完成日期： 2 0 1 5 年5 月2 ．7 ．1 0 密碼子優(yōu)化????????

3、??????????????????????．2 62 ．7 ．11 匹諾塞林工程菌的構(gòu)建及發(fā)酵??????????????????????．2 6第三章對香豆酸輔酶A 連接酶功能鑒定??????????????????2 7引言??????????????????????????????????????．2 73 ．1 實驗方法??????????????????????????????????一2 73 ．1 ．I 虎眼萬年青轉(zhuǎn)錄組

4、測序及序列分析?????????????????????2 73 ．1 ．2 虎眼萬年青全c D N A 合成及O s a 4 C L 的克降?????????????????2 73 ．1 ．3 表達載體構(gòu)建??????????????????????????????2 83 ．1 ．4 重組O s a 4 C L 蛋白表達和檢測???????????????????????2 83 ．1 ．5O s a 4 C L 蛋白酶功能鑒定?

5、????????????????????????2 83 ．2 實驗結(jié)果??????????????????????????????????～2 93 ．2 ．1 生物信息學分析?????????????????????????????2 93 ．2 ．2 重組蛋白的誘導表達檢測?????????????????????????3 33 ．2 ．3 O s a 4 C L 家族的功能鑒定?????????????????????????

6、。3 43 ．3 本章小結(jié)??????????????????????????????????．．3 6第四章查爾酮合酶和查爾酮異構(gòu)酶的克隆、功能鑒定????????????．3 7引言??????????????????????????????????????．3 74 ．1 實驗方法???????????????????????????????????3 84 ．1 ．1O s a C H S 和O s a C H l 克隆及表達載

7、體的構(gòu)建?????????????????．3 84 ．1 ．2 重組蛋白的誘導表達、純化及W e s t e r n ．B l o t 檢測???????????????3 94 ．1 ．3O s a C H S 蛋白家族酶功能鑒定???????????????????????．3 941 ．3 ．1 酶促反應(yīng)法???????????????????????????．3 94 ．1 ．3 ．2 構(gòu)建匹諾塞林工程菌法??????????

8、????????????．4 04 ．1 ．4O s a C H l 蛋白酶功能鑒定?????????????????????????一4 34 ．2 實驗結(jié)果??????????????????????????????????．．4 44 ．2 ．1 O s a C ^ 心和O s a C H I 生物信息學分析????????????????????．．4 44 ．2 ．2O s a C H S 和O s a C H l 誘導表達和

9、W e s t e r n ．B l o t 檢測??????????????．．4 84 ．2 ．3O s a C H S 功能鑒定????????????????????????????4 94 ．2 ．3 ．1 體外酶促反應(yīng)鑒定法???????????????????????．4 94 ．2 ．3 ．2 構(gòu)建工程菌法??????????????????????????．5 14 ．2 ．4O s a C H l 功能鑒定?????