根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將fpf1基因?qū)敫仕{(lán)型油菜brassicanapusl.

1、西南農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將FPF1基因?qū)敫仕{(lán)型油菜（Brassicanapus L.）姓名：黃瓊?cè)A申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：楊光偉;裴炎2002.5.1_ ．童●l ' 4 9常。說明F P F l 基因已經(jīng)導(dǎo)入晚熟油菜并己在轉(zhuǎn)基因植株中得到表達(dá)。5 ．G A 對(duì)，R F l 基因在植物中表達(dá)調(diào)控的影響用2 ．5 m g ／L 的G A 3 分別處理轉(zhuǎn)基因植株和未轉(zhuǎn)化植株，與未處理的

2、轉(zhuǎn)化植株及其陰性苗同時(shí)移栽大田，觀察這四種處理下植株的形態(tài)及花期發(fā)育的結(jié)果顯示，G A 3 處理過的轉(zhuǎn)基因植株較未經(jīng)處理的轉(zhuǎn)化植株早花性狀更明顯，而經(jīng)G A 3 處理的陰性植株其始花期卻又明顯滯后于正常的轉(zhuǎn)化植株。這一結(jié)果表明，G A 可能參與調(diào)控刀下1 基因在植物中的表達(dá)，進(jìn)而調(diào)控植物的開花時(shí)間。6 ．轉(zhuǎn)基因植株的分子生物學(xué)檢測(cè)對(duì)兩個(gè)品系田間鑒定表現(xiàn)出明顯早花性狀的轉(zhuǎn)基因株系進(jìn)行篩選標(biāo)記基因N P T I I 的P C R 檢測(cè)，多次

3、重復(fù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果表明：其中有7 個(gè)株系的轉(zhuǎn)化抗性植株每次均能得到與陽性對(duì)照相同的擴(kuò)增帶( 6 9 8 b p ) ，進(jìn)一步說明N P T I I 基因己整合進(jìn)油菜細(xì)胞核基因組中．根據(jù)已發(fā)表在G e n e b a n k 上的擬南芥F P F l 基因序列設(shè)計(jì)并合成了引物。對(duì)油菜基因組D N A 進(jìn)行F P F l 目的基因的P C R 檢測(cè)，對(duì)于ⅣP ，I I 基因檢測(cè)結(jié)果呈陽性的轉(zhuǎn)基因株系也均擴(kuò)增出與陽性對(duì)照完全一致的帶，約3 3 0