geotrichumsp.sybcwu3產(chǎn)脂肪酶發(fā)酵條件優(yōu)化及酶學(xué)性質(zhì)研究

1、江南大學(xué)碩士學(xué)位論文Geotrichum sp.SYBC WU-3產(chǎn)脂肪酶發(fā)酵條件優(yōu)化及酶學(xué)性質(zhì)研究姓名：王蕾申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：廖祥儒;蔡宇杰20080601A b s t r a c tA b s t r a c tL i p a s e s 8 2 e i m p o r t a n te n z y m e s u n i v e r s a l l y a p p l i e di ni n

2、d u s t r i e s ；i t i ss i g n i f i c a n t t o s c r e e nn e w l i p a s er e s o u r c e sa n d t oc h a r a c t e r i z en o v e l l i p a s e sf o r s p e c i f i ca p p l i c a t i o n ．A s t r a i no f l i p a s

3、 ep r o d u c i n g m i c r o b i a lw a s i s o l a t e df r o mn a t u r e ．I tW a sm o r p h o l o g i c a l l yi d n t i f i e d a sG e o t r i c h u m ．s p a n d t e r m e d a sG e o t r i c h u ms p ．S Y B CW U - 3

4、 ．朋1 ee f f e c t o f i n d u c i n g a g e n t sa n d s u e f a c t a n t s 0 nt h e 1 i p a s ep r o d u c t i o n o f G e o t r i c h u ms p ．S Y B C W U ．3W a s i n v e s t i g a t e d ．n l e r e s u l t s s h o w e

5、dt h a t o l i v e o i l ，n u t s c o m p o s i t eo i l ，T w e e n - 2 0 ，T w e e n - 8 0 ，a n d T r i t o o n X - l 0 0c o u l d p r o m o t e l i p a s ep r o d u c t i o n b yG e o t r i c h u ms p ．S Y B CW U ．3 ．w

6、h e nn u tc o m p l e xo i la n dT r i t o o n X ．1 0 0o ro l i v eo i la n dT r i t o o n X ．1 0 0W a Sa d d e d t Ot h e m e d i u m ．a(chǎn) n e w i s o z y m e n a m e d a sL I P ．1 c o u l db e i n d u c e d ，t h ec o n s

7、 t i t u t i v el i p a so f G e o t r i c h u ms p ．S Y B C W U ．3W a s t e r m e d a sL I P ．2 ． m o p t i m u mm e d i u m f o r t h e y i e l d o f l i p a s e w a st h a t c o n t a i n i n g p e p t o n e5 g ／L ，N

8、a H z P 0 43 9 ／L , n u t so i l2 5 0 m L ／L ，P o l y o x y e t h y l e n ep o l y g l y c o le t h e r2 5 m L ／L ．T h es t r a i nW a sc u l t i v a t e da tt h et e m p e r a t u r eo f 3 0 ℃f o r 7 2h ．n l ee n z y m

9、e a c t i v i t yu n d e r t h eo p t i m a lc o n d i t i o n W a s 3 ．2 f o l d s o f t h a tu n d e r t h e c o n d i t i o n b e f o r eo p t i m i z a t i o n ．I s o z y m eL I P - 1a n dL I P - 2 W a s p u r i f i

10、e db yD E A E 一3 2c h r o m a t o g r a p h y ，S e p h a d e xG - 1 0 0g e lf i l t r a t i o n a n dt w o ．p h a s e e x t r a c t i o n ．L I P ．1 a n dL I P ．2 w a s p u r i f i e d 15 ．6 a n d2 2 f o l d sr e s p c t

11、i v e l y ．T h e i r r e c o v e r yw a s 1 1 ．1 5 ％a n d 17 ．9 ％r e s p e c t i v e l y ．B o t hL I P ．1a n d L I P ．2W a sc o l d - a d a p t e da l k a l i n el i p a s e ．n l e i r o p t i m a lp H i n5 0m m o l ／Lp

12、H 7 ．0T r i s - H C Ib u f f e ra l e9 ．5 ．B o t ho f t h e ms h o w e d h i g hl i p o l y t i ca c t i 譏t yf r o mp H 3 ．0 t o9 ．O ．T h eo p t i m a l c a t a l y t i c t e m p e r a t u r eo f L I P ．1a n d L I P ．2W

13、a s2 0 ℃a n d 1 5 ℃r e s p e c t i v e l y ．L I P ．1W a sl a b i l ea t5 0 ℃，L I P ·2W a S l a b i l ea t4 0 ℃．L P 一1h a d s t r o n g e ra b i U t y t oh y d r o l y t el o n gc h a i n f a t t ya c i de s t e r s

14、a n dL I P 一2h a dh i 曲h y d r o l y s i sa b i l i t yt o h y d r o l y t es h o r tc h a i nf a t t ya c i d e s t e r s ．K e y w o r d s ：l i p a s e ；m i c r o o r g a n i s m ；o p t i m i z a t i o n ；p u r i f i c