產(chǎn)底溫α-淀粉酶菌株的篩選、發(fā)酵條件優(yōu)化及酶學(xué)性質(zhì)研究.pdf

1、α-淀粉酶(α-amylase，EC3.2.1.1)可以水解淀粉分子α-1，4-葡萄糖苷鍵，形成的水解產(chǎn)物包括糊精、麥芽寡糖、麥芽糖和葡萄糖等。α-淀粉酶在全球工業(yè)酶制劑中占有重要地位，應(yīng)用極為廣泛，包括淀粉液化、發(fā)酵、制藥、紡織、造紙、污水處理等多個(gè)領(lǐng)域。
　　本著就近取材的原則，本文從秦皇島近海的海泥、海藻、海鮮等樣本中進(jìn)行產(chǎn)α-淀粉酶菌株篩選，并對(duì)得到的菌株進(jìn)行紫外誘變，進(jìn)一步獲得高產(chǎn)突變株，在此基礎(chǔ)上對(duì)突變株產(chǎn)酶條件進(jìn)行了

2、優(yōu)化和酶學(xué)特性研究，結(jié)果如下:
　　通過(guò)對(duì)菌株進(jìn)行初篩和復(fù)篩，獲得一株高產(chǎn)低溫α-淀粉酶的菌株，經(jīng)18sRNA測(cè)序鑒定為許旺酵母Schwanniomyces，命名為Schwanniomyces.sp QX210，QX代表秦皇島海蟹樣本，210為菌株編號(hào)。
　　Schwanniomyces.sp QX210菌株發(fā)酵48h后α-淀粉酶產(chǎn)量達(dá)到最大值122.25U/L;25℃時(shí)發(fā)酵產(chǎn)酶量最高，為137.32U/L;在pH6.0-9

3、.0范圍發(fā)酵，最適產(chǎn)酶pH為8.0，產(chǎn)酶量達(dá)到142.86U/L。有機(jī)碳、氮能提高產(chǎn)酶量，其中可溶性淀粉、牛肉浸膏和蛋白胨對(duì)產(chǎn)酶影響最大;四因素、三水平的正交優(yōu)化后發(fā)現(xiàn)，在培養(yǎng)基中添加0.1％的可溶性淀粉、0.75％的牛肉膏，25℃，發(fā)酵48h后，QX210產(chǎn)酶量達(dá)到最高值，為167.6U/L。
　　對(duì)QX210所產(chǎn)的低溫淀粉酶性質(zhì)的研究發(fā)現(xiàn)，該酶的最適作用溫度35℃，最適作用pH為8.0。Ca2+可以顯著提高α-淀粉酶的熱穩(wěn)定性