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1、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目 血糖的測(cè)定(72-1)3學(xué)時(shí),【臨床意義】,正常成人空腹靜脈血糖含量為3.89~6.11mmol/L。空腹血糖高于6.11 mmol/L稱為臨界高血糖,高于7.5~mmol/L稱為高血糖,高于8.89~10.0mmol/L出現(xiàn)糖尿現(xiàn)象??崭寡堑陀?.0mmol/L稱為低血糖。,【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?掌握血糖測(cè)定的原理、操作方法和臨床意義。,【實(shí)驗(yàn)原理】,(3)用72-1型分光光度計(jì)測(cè)出紅色化合物的吸光度, 再用
2、公式求出葡萄糖含量。,【實(shí)驗(yàn)器材】,,試管、水浴箱、洗耳球、五檔微量移液器、刻度吸量管(5ml)、72-1型分光光度計(jì)。,【實(shí)驗(yàn)器材】,五檔微量移液器,使用方法:,1.將吸嘴套在移液器頭上輕輕轉(zhuǎn)動(dòng),以保證密封。2.使用前應(yīng)先將移液器吸液和排液幾次,潤(rùn)洗吸嘴和保持 腔內(nèi)外氣壓一致。3.選擇量程。4.垂直地握住移液器,將按鈕按到第一停止點(diǎn),然后把吸嘴浸入到液面下2~3mm,再緩慢放松按鈕,使之復(fù)位,等待1~2秒后,從液體中取出,并避
3、免碰撞任何物體。5.將吸液嘴移至加樣容器壁上,緩慢地把按鈕按到第一停止點(diǎn),等待1~2秒,再把按鈕全部按下去,排盡液體后,吸液嘴應(yīng)沿容器壁上滑動(dòng)取出,再放松按鈕,使之復(fù)位,即完成。6.最后,打掉用過的吸液嘴,調(diào)回最大量程,儀器放置好保存。,【實(shí)驗(yàn)器材】,72-1型分光光度計(jì),工作原理,物質(zhì)對(duì)光的吸收具有選擇性,不同的物質(zhì)都有各自的吸收波長(zhǎng)。在一定波長(zhǎng)下,某物質(zhì)的溶液對(duì)光的吸收強(qiáng)弱(吸光度A)與溶液的濃度C和液層的厚度L的乘積成正比,即
4、遵循朗伯-比爾定律: A=K·C·L (K為吸收系數(shù),對(duì)同一物質(zhì)來說為一常數(shù)),使用方法:1.檢查 :指針位于“0”。 2.打開電源,打開比色皿暗箱蓋,預(yù)熱20分鐘。3.加樣:夾毛面,擦干。 4.放置好比色皿,選擇波長(zhǎng)、調(diào)靈敏度。5.反復(fù)調(diào)0、調(diào)100至穩(wěn)定。 6.合蓋,讀數(shù),記錄,取樣,清洗,關(guān)閉儀器。,(1)血清(2)G標(biāo)準(zhǔn)液:5.55 mmol/L(
5、3)酶試劑 (4)酚試劑,【實(shí)驗(yàn)試劑】,【實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和操作過程】,1. 加樣【取2支干凈試管,分別標(biāo)明測(cè)定(T)、標(biāo)準(zhǔn)(S)】,然后按表加入試劑:,2.將樣品混勻后,置于37℃水浴箱中水浴15min。 3.用分光光度計(jì)在波長(zhǎng)505nm(光徑1cm), 以空白管調(diào)零O——100,分別讀取其余兩管吸光度值,即記錄測(cè)定管T、標(biāo)準(zhǔn)管S的吸光度值(AT、AS ) 。,1.記錄測(cè)定管T、標(biāo)準(zhǔn)管S的吸光度值?! T、
6、AS,【實(shí)驗(yàn)結(jié)果】,CG標(biāo)準(zhǔn)液= 5.55 mmol/L,2.計(jì)算公式:,(濃度C單位——mmol/L),【結(jié)果分析】,經(jīng)過計(jì)算得到的血糖濃度為多少,是否在人體血糖濃度的正常范圍內(nèi)(空腹血糖濃度為3.89~6.11mmol/L),若在說明什么,若不在有說明什么。,血糖測(cè)定有哪些臨床意義。,【作業(yè)】,1.加樣時(shí),看準(zhǔn)試管標(biāo)示(T、S)再加試劑。 2.加試劑時(shí),看準(zhǔn)用量(µl、ml)再取。 3.分光光度計(jì)測(cè)定吸光度值(AT、
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