抑制p38MAPK-ATF2信號通路對APPswe-PS1dE9小鼠認知功能障礙的改善作用及其分子機制研究.pdf

1、目的：探討在APPswe/PS1dE9小鼠體內(nèi)通過給予SB239063特異性抑制p38 MAPK/ATF2信號通路后對阿爾茨海默病所致的認知功能障礙的影響以及對AD病理過程的調(diào)控作用及其分子機制。
　　方法：6月齡雄性APPswe/PS1dE9（APP/PS1）小鼠作為AD模型小鼠，6月齡雄性C57BL/6J小鼠作為野生型（WT）對照小鼠，四組實驗小鼠被隨機分為WT+SB239063治療組、WT對照組、APPswe/PS1dE9+

2、SB239063治療組和APPswe/PS1dE9對照組。治療組小鼠接受腹腔注射SB239063藥物溶液（用3％DMSO生理鹽水溶液溶解，給藥劑量為15mg/kg），對照組小鼠接受腹腔注射相應體積的3%DMSO生理鹽水溶液，1次/日連續(xù)給藥6周。分別采用Morris水迷宮、酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）和蛋白質(zhì)印跡法（Western Blot）分別評估各組小鼠的空間學習記憶功能、各種Aβ含量、APP不同代謝途徑的代謝產(chǎn)物和關鍵酶的改變、影

3、響Aβ清除的降解酶、tau蛋白在不同位點的磷酸化水平、參與tau蛋白磷酸化改變的相關蛋白激酶以及對神經(jīng)突觸的結(jié)構(gòu)和功能有重要影響的蛋白的表達水平變化情況。
　　結(jié)果：Morris水迷宮結(jié)果顯示，與APPswe/PS1dE9對照組相比，抑制p38 MAPK/ATF2信號通路能夠明顯縮短APPswe/PS1dE9小鼠找到隱藏平臺所需的潛伏期（P＜0.01），增加APPswe/PS1dE9小鼠在目標象限停留時間百分比（P＜0.05）和穿

4、越原平臺區(qū)域的次數(shù)（P＜0.01）。ELISA結(jié)果顯示，抑制p38 MAPK/ATF2信號通路能夠顯著減少APPswe/PS1dE9小鼠腦內(nèi)可溶性和不可溶性的Aβ42（P＜0.05）、Aβ40（P＜0.05），可溶性Aβ寡聚體含量也顯著降低（P＜0.01）。Western blot結(jié)果顯示，抑制p38 MAPK/ATF2信號通路后APPswe/PS1dE9小鼠腦內(nèi)皮層和海馬組織中的p-p38MAPK（P＜0.01）、p-ATF2(P＜0

5、.01)、p-APP(P＜0.01)、sAPPβ（P＜0.05）、BACE1（P＜0.01）、PS1（P＜0.01）、p-tau(Thr205)（P＜0.01）、p-tau(Ser404)（P＜0.05）、p-GSK3β(Tyr216)（P＜0.01）、p-Cdk5(Tyr15)（P＜0.01）的表達水平明顯下降；相反地，sAPPα（P＜0.01）、ADAM10（P＜0.01）、NEP（（P＜0.01））、IDE（P＜0.05）、PSD

6、-95（P＜0.05）、SYP（P＜0.01）的表達水平顯著升高。
　　結(jié)論：我們的實驗證明了抑制p38 MAPK/ATF2信號通路能夠通過調(diào)控APP代謝中的關鍵酶促使APP代謝向非淀粉樣蛋白途徑轉(zhuǎn)化減少Aβ的生成，并且增加Aβ降解酶的表達共同阻止Aβ的聚集和沉積；通過抑制p38 MAPK、GSK3β和Cdk5的異?；罨瘻p少tau蛋白高度磷酸化水平；還能上調(diào)突觸相關蛋白PSD-95和SYP的表達逆轉(zhuǎn)AD病理過程中突觸結(jié)構(gòu)和功能的損