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1、臨床微生物學(xué):涂片找抗酸桿菌(改良堿性復(fù)紅法)第1版第0次修改第1頁共4頁1方法:改良堿性復(fù)紅法。2原理:結(jié)核菌、麻瘋桿菌、恥垢菌等抗酸性菌,因其菌體表面有一層脂或脂質(zhì)之皮膜不易著色,但一經(jīng)著色后酸或乙醇的作用亦是不容易把它脫色。利用這特性并以增強(qiáng)的染色液予染色,然后再以酸及乙醇加以處理,使其脫色后再對比染色,此時抗酸性菌仍是固定著最初色素的顏色(紅色)。3試劑3.1妻納石炭酸復(fù)紅溶液堿性復(fù)紅乙醇飽和溶液10ml5%石炭酸溶液90ml3
2、.2脫色劑濃鹽酸3ml95%乙醇97ml3.3復(fù)染液(呂弗勒美藍(lán)液)美藍(lán)乙醇飽和溶液30ml10%氫氧化鉀0.1ml蒸餾水100ml4試劑貯存:棕色瓶室溫存放。5質(zhì)量控制:每批配制后測試,結(jié)核分枝桿菌應(yīng)為陽性。6操作步驟6.1涂片經(jīng)火焰固定加石炭酸復(fù)紅溶液蓋滿整個痰膜,徐徐加熱至有蒸汽出現(xiàn)切不可沸騰。染5min(若染色奴卡菌需要加長時間)用清潔水從玻片一端輕緩沖洗沖去染色液瀝去剩余的水。6.2加脫色劑不時搖動玻片至無紅色脫落為止用清潔水
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