正交試驗法優(yōu)選萸丹膠囊的水提工藝

1、1正交試驗法優(yōu)選萸丹膠囊的水提工藝陳威1，侯偉源2，劉堅初2，葉炳皇1，賀倩1，張軍1，林吉1，（1廣州中醫(yī)藥大學，廣州510006；2中山黃圃人民醫(yī)院，廣東中山528429）摘要：目的摘要：目的優(yōu)選萸丹膠囊的水提工藝。方法方法以馬錢苷、丹酚酸B、綠原酸的綜合保留率為評價指標，應(yīng)用正交試驗設(shè)計對萸丹膠囊的水提工藝進行優(yōu)選。結(jié)果結(jié)果優(yōu)選出的提取工藝為山茱萸、丹參、茵陳、羅布麻葉等藥味先以8倍量水浸泡0.5h，煎煮1h，過濾，濾渣再加6倍量

2、水煎煮1h。結(jié)論結(jié)論該工藝合理，可為確定萸丹膠囊的生產(chǎn)提供實驗依據(jù)。關(guān)鍵詞：關(guān)鍵詞：萸丹膠囊；正交設(shè)計；馬錢苷；丹酚酸B；綠原酸OptimizationofWaterExtractionTechniqueofYudanCapsuleswiththogonalExperimentCHENWei1，HOUWeiyuan2，LIUJianchu2，YEBinghuang1，HEQian1，ZHANGJun1LINJi1（1GuangzhouU

3、niversityofChineseMedicine，Guangzhou510006；2HuangpuPeoplesHospitalofZhongshan，GuangdongZhongshan528429）Abstract：0bjectiveTooptimizetheextractiontechniquefYudancapsulesMethodWiththecomprehensiveextractionratesofloganinsal

4、vianolicacidBchlogenicacidthewaterextractionconditionsofYudancapsuleswereoptimizedbythogonaldesign.ResultTheoptimalextractiontechniquewasasfollows：themixtureofmedicalmaterialswasfirstlymarinatedwith8timesofwaterf0.5hthen

5、decoctedf1hthefilterresiduesadded6foldswaterdecoctedf1h.ConclusionTheextractiontechniquefYudancapsulesisreliablewhichoffersexperimentalbasisftheindustrializedextractionofthecapsulesKeywds：Yudancapsulethogonaldesignlogani

6、nsalvianolicacidBchlogenicacid萸丹膠囊為中山黃圃人民醫(yī)院醫(yī)院制劑，由山茱萸、丹參、茵陳、羅布麻葉等藥味組成，具有補益肝腎、清熱活血等功效，用于輔助治療肝腎陰虛，血熱瘀阻癥型高血壓。本方中主藥山茱萸有，為收斂性強壯藥，有補肝腎止汗的功效[1]，有抗休克、強心及抗心率失常的作用[23]，山茱萸中主要含有沒食子酸、熊果酸、齊墩果酸、山茱萸苷、馬錢子苷、多糖類等有效成分[4]。丹參中的水溶性成分具有抗氧化、抗凝、抗

7、血栓、抗心腦血管缺血及調(diào)血脂、抗炎、增強免疫力多種藥理活性，常用于治療冠心病及缺血性腦血管病[5]。其中丹參水溶性成分主要為酚酸類，其中丹酚酸B約70%[6]。茵陳除保肝利膽外，還具有抗病原微生物、鎮(zhèn)痛消炎、降血脂、增強免疫、抗腫瘤等方面的活性[7]。羅布麻葉能平肝安神，對人體心血管系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)等均有藥理作用[8]。目前有關(guān)萸丹膠囊提取工藝和含量測定的研究未見報道本實驗以山茱萸中馬錢苷、丹參中丹酚酸B、茵陳與羅布麻葉中的綠原酸的綜合保

8、留率為指標，采用高效液相色譜法建立其含量測定的方法，以單因素考察結(jié)合正交實驗設(shè)計法優(yōu)選萸丹膠囊的水提工藝，為萸丹膠囊的制劑研究奠定基礎(chǔ)。1材料島津LC20A高效液相色譜儀(配有四元泵、在線脫氣機、自動進樣器、UV檢測器和Labsolution色譜工作站，日本島津公司)；萬分之一分析天平（MettlerToledoCP225D）；十萬分之一分析天平（MettlerToledoAB204N）。馬錢苷對照品（批號：110602，規(guī)格：20mg

9、，上海融禾醫(yī)藥科技發(fā)展有限公司）；丹酚酸B對照品（批號:110305規(guī)格：20mg，上海融禾醫(yī)藥科技發(fā)展有限公司）；綠原酸對照品（批號：110753200413規(guī)格：20mg，中國藥品生物制品檢定所）；色譜甲醇（Merck），水為自制超純水，其余試劑為分析純。2方法與結(jié)果1[基金項目]廣東省產(chǎn)學研項目（KCF209112K05）[第一作者]陳威，碩士研究生，Tel：15018419003，Email：chenwei2009.good@[

10、通訊作者]張軍，博士，研究員，碩士生導師，主要從事復(fù)方中藥新藥開發(fā)研究。Tel：（020）39358519，Email：zhjxsh@.cn表1正交試驗因素水平表水平加水量（A）倍浸泡時間(B)min煎煮時間(C)h18、600.5210、8151.0312、10301.5按處方比例稱取全方藥材，共9份，按L9(34)正交試驗安排表進行實驗。各次提取液放冷，濾過，測定體積。按照供試品溶液制備方法制備供試品，測定并計算綜合保留率。對正交的

11、結(jié)果進行直觀分析，結(jié)果見表2。表2正交試驗綜合保留率直觀分析表因素結(jié)果試驗號加水量(A)倍浸泡時間(B)min煎煮時間(C)h誤差(D)馬錢苷保留率%丹酚酸B保留率%綠原酸保留率%綜合保留率%1111188.2360.7451.5766.852122283.779.0849.4770.753133383.7369.6661.2371.544212384.9869.8543.0865.975223184.7268.8441.2464.93

12、6231294.4287.0457.7379.737313293.7969.0942.5968.498321384.5274.3147.1268.659332189.6569.5957.4372.22均值169.12367.10371.4868.293均值269.96767.81369.19372均值370.0674.23368.47768.857極差0.9377.133.0033.707綜合保留率=（馬錢苷保留率丹酚酸B保留率綠原酸保

13、留率）3由直觀分析可以看出，各因素對綜合保留率影響程度依次為：B﹥C﹥A，其中B因素影響最大。C因素和A因素對綜合保留率影響較小，綜合考慮指標成分保留率和臨床湯劑經(jīng)驗，將因素C確定為水平2；基于后續(xù)濃縮、干燥工藝的時間和效率，將因素A確定為水平1。因此最終篩選提取條件為A1B3C2，即先以8倍量水浸泡0.5h，煎煮1h，過濾，濾渣再加6倍量水煎煮1h。2.3驗證性試驗稱取處方劑量的各味藥材，按優(yōu)選出的最佳提取方法重復(fù)提取三批，參照供試品

14、溶液的處理方法，測定馬錢苷、丹酚酸B和綠原酸的綜合保留率，結(jié)果分別為68.74%、68.30%、66.69%。證明所優(yōu)選出的提取工藝合理、穩(wěn)定、可行。3討論影響湯劑保留率最主要的因素是提取次數(shù)，且沈群[9]認為提取次數(shù)加在正交表中是不合理的，因此本實驗先進行提取次數(shù)的單因素考察，確定提取次數(shù)再進行正交試驗考察其它因素的影響。中藥復(fù)方的功能主治是多成分、多靶點、多途徑綜合作用的結(jié)果，單一的指標成分很難證明工藝的科學合理性，賈英杰等[10]