天蠶素抗菌肽在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用

1、天蠶素抗菌肽在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用,黃滄海 博士集美大學(xué),內(nèi) 容,抗菌肽抗菌肽在水產(chǎn)上的研究與應(yīng)用天蠶素抗菌肽－水產(chǎn)飼料添加劑天蠶素抗菌肽－水產(chǎn)藥物,抗菌肽,天蠶素、蜜蜂肽、馬蓋寧、鱟素等在誘導(dǎo)條件下，動(dòng)物免疫防御系統(tǒng)產(chǎn)生的一類對(duì)抗外源性病原體致病作用的防御性肽類活性物質(zhì)分子量小，穩(wěn)定性好，水溶性好，抗菌機(jī)理獨(dú)特，對(duì)高等動(dòng)物正常細(xì)胞無害雙親結(jié)構(gòu)，陽離子型具有較強(qiáng)的廣譜抗菌能力，對(duì)革蘭氏陽性菌及陰性菌均有殺傷作用，對(duì)真菌、

2、寄生蟲、病毒、腫瘤細(xì)胞也有一定的抑殺作用,抗菌肽與肽類抗生素…,第一代糖肽類抗生素：萬古霉素、替考拉寧、去甲萬古霉素第二代糖肽類抗生素：Dalbavancin、Oritavancin、Telavancin環(huán)脂肽類抗生素：多粘菌素、桿菌肽、達(dá)托霉素抗菌肽種類多、來源多、抗菌譜廣,抗菌肽與肽類抗生素…,抗生素主要是細(xì)菌、真菌或放線菌發(fā)酵的產(chǎn)物，由酶促反應(yīng)合成；抗菌肽是生物基因編碼在核糖體上合成抗生素含非蛋白質(zhì)氨基酸（D-氨基酸），多

3、為鎖環(huán)狀肽鏈；抗菌肽都是L-氨基酸，含有雙親α-螺旋或β-折疊結(jié)構(gòu)的帶正電荷的線性肽鏈，不含其他附加基團(tuán),…抗菌肽與肽類抗生素,糖肽類抗生素抑制細(xì)胞壁的合成；抗菌肽通過與帶負(fù)電荷的微生物細(xì)胞膜直接作用，改變其通透性，造成膜的物理性損傷，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)容物外滲而死亡抗生素發(fā)揮作用要通過微生物細(xì)胞膜上或胞內(nèi)特異的受體，且受體類型有限，微生物容易通過變異產(chǎn)生耐藥性；抗菌肽是通過陰陽離子的物理作用，可以很快殺滅微生物而不產(chǎn)生耐藥性,抗菌肽的抑菌作

4、用機(jī)理,離子通道模型可變毯模型抑制細(xì)胞壁形成抑制細(xì)胞呼吸誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡攻擊線粒體影響細(xì)胞染色體斷裂癌細(xì)胞骨架系統(tǒng)抗菌肽的抗菌機(jī)制應(yīng)該有多種,抗菌肽的作用模式圖,抗菌肽的抗病毒作用機(jī)理,天蠶素能直接與病毒外殼作用，導(dǎo)致病毒外殼的通透性增加裂解病毒顆粒阻斷病毒與細(xì)胞融合抑制病毒復(fù)制,抗菌肽的作用特點(diǎn),抗菌肽作用于細(xì)菌的細(xì)胞膜，使其通透性增大，從而殺滅細(xì)菌。細(xì)菌必需改變膜的結(jié)構(gòu)才能防御抗菌肽的進(jìn)攻，改變膜的結(jié)構(gòu)意味著要改變

5、多個(gè)基因只對(duì)原核生物細(xì)胞和病變真核生物細(xì)胞有抑制作用，真核生物細(xì)胞膜含有大量的膽固醇，使膜結(jié)構(gòu)趨于穩(wěn)定，高等動(dòng)物細(xì)胞存在高度發(fā)達(dá)的細(xì)胞骨架系統(tǒng),抗菌肽在水產(chǎn)上的研究,1、1988年Nakamura T等首次對(duì)海洋生物亞洲鱟提取純化，獲得鱟肽素，低濃度能抑制革蘭氏陰性和陽性細(xì)菌的生長(zhǎng)。2、Azumi K等(1990)從一種海鞘的血細(xì)胞中分離獲得抗菌肽Haloyaminen，并試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)其可抑制某些魚RNA病毒和某些海水細(xì)菌的生長(zhǎng) 。,抗

6、菌肽在水產(chǎn)上的研究,3、1997年Destoumieux等從養(yǎng)殖南美白對(duì)蝦血細(xì)胞和血漿中分離到了幾種抗菌活性因子，其中3種具有抗真菌、細(xì)菌尤其是革蘭氏陽性菌的能力 4、 1996年，以色列學(xué)者Oren從豹鰨體內(nèi)分離得到Pardaxin此肽具有比蜂毒素更強(qiáng)的抗菌活性和更低的人紅血球溶血活性5、Mitta等從兩種貽貝中分離到多種抗菌肽,抗菌肽在水產(chǎn)上的研究,黃平等研究了草魚腸道的抗菌肽37℃，30分鐘，大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和嗜水氣

7、單胞菌的細(xì)胞膜皺縮破裂胰蛋白酶消化37℃、 16小時(shí)，對(duì)其結(jié)構(gòu)和抑菌活性無影響100 ℃，30分鐘對(duì)其抑菌活性無影響,抗菌肽在水產(chǎn)上的研究,李思明等（2007）從稚鱷龜組織提取的抗菌肽對(duì)有效抑制沙門氏菌和嗜水氣單胞菌劉慧明等（2008）研究鱟抗菌肽對(duì)隱球菌和枯草芽孢桿菌具有抑制作用，而對(duì)變形桿菌無效,1、姜蘭等（2002）研究發(fā)現(xiàn)，抗菌肽對(duì)水產(chǎn)養(yǎng)殖過程中常見病原菌—嗜水氣單胞菌、梅氏弧菌、遲鈍愛德華氏菌及溫和氣單胞菌均有較好的抑菌

8、效果,抗菌肽在水產(chǎn)動(dòng)物的應(yīng)用,2、黃自然等（2005）比較了抗菌肽、金霉素和空白對(duì)照對(duì)南美白對(duì)蝦的效果，認(rèn)為：抗菌肽在對(duì)蝦飼料或水體中能控制水中的微生物，使致病微生物如弧菌等均能殺滅，通過飼料攝入蝦體內(nèi)可以促進(jìn)生長(zhǎng)和提高免疫力,抗菌肽在水產(chǎn)動(dòng)物的應(yīng)用,3、王廣軍等（2005）等在飼料中添加抗菌肽。 結(jié)果發(fā)現(xiàn)：飼料中添加抗菌肽對(duì)南美白對(duì)蝦的生長(zhǎng)有顯著影響，平均終末體重比對(duì)照組提高了23%，日生長(zhǎng)速度提高了58%，相對(duì)增重率提高了19

9、%，成活率提高了9%，飼料系數(shù)降低了13%,抗菌肽在水產(chǎn)動(dòng)物的應(yīng)用,抗菌肽在水產(chǎn)動(dòng)物的應(yīng)用,李清等（2004）在草魚飼料中添加抗菌肽可提高生長(zhǎng)速度、存活率，促進(jìn)礦物元素的吸收和利用劉福星等（2004）在凡納濱對(duì)蝦飼料中添加抗菌肽，生長(zhǎng)速度、飼料轉(zhuǎn)化率、成活率和飽滿度均提高了,抗菌肽在羅非魚飼料中的應(yīng)用,天蠶素抗菌肽－水產(chǎn)飼料添加劑,抗菌肽在大黃魚飼料中的應(yīng)用,,FDA僅批準(zhǔn)土霉素和磺胺二甲氧嗪(Ormetoprim)用于水產(chǎn)動(dòng)物藥物添

10、加劑允許使用的飼料添加劑品種目錄 禁止在飼料和動(dòng)物飲用水中使用的藥物品種目錄,試驗(yàn)一 CAD對(duì)羅非魚幼魚生產(chǎn)性能的影響（2000尾，集美大學(xué)，2009年，56天）,,（共4個(gè)處理，每個(gè)處理10個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)50尾）,試驗(yàn)二 抗菌肽與幾種常用促生長(zhǎng)抗生素效果對(duì)比試驗(yàn)（800尾，集美大學(xué)，2009年，56天）,注：肽合素為抗菌肽的商品名,試驗(yàn)三 抗菌肽對(duì)大黃魚的影響,試驗(yàn)對(duì)象：大黃魚幼魚（32g）試驗(yàn)地點(diǎn) ：福建省寧德市

11、某大型養(yǎng)殖場(chǎng)試驗(yàn)設(shè)計(jì)：對(duì)照組（25%大蒜素，150g/t;三黃粉125g/t ）、抗菌肽100g/t試驗(yàn)設(shè)備：浮伐式網(wǎng)箱（4×8×3.5m ）試驗(yàn)時(shí)間：2009.10.25—2009.12.20（共56天）,試驗(yàn)網(wǎng)箱,試驗(yàn)結(jié)果,,飼料中添加100ppm抗菌肽可以明顯提高水產(chǎn)動(dòng)物的生長(zhǎng)速度，降低飼料效率，提高性價(jià)比。,天蠶素抗菌肽－水產(chǎn)藥物,預(yù)防用藥治療用藥消毒用藥,水產(chǎn)藥物的應(yīng)用現(xiàn)狀,,現(xiàn)狀專業(yè)漁藥生產(chǎn)企

12、業(yè)300多家，品種500多個(gè)，產(chǎn)量2.5萬噸，產(chǎn)值4億多元。種類：消毒劑、驅(qū)殺蟲劑、水質(zhì)（底質(zhì)）改良劑、抗菌藥、中草藥漁民基本上靠漁藥控制水產(chǎn)動(dòng)物疾病漁藥的安全使用是一個(gè)重要的社會(huì)問題,,存在的問題漁藥藥理學(xué)等理論研究薄弱，難于制定科學(xué)的殘留限量、給藥劑量、休藥期、使用規(guī)范等。有效安全的漁藥及其劑型貧乏，制劑的工藝水平低。散劑占85%以上，輔料多借用人獸藥。漁藥市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)無序、混亂現(xiàn)象嚴(yán)重。2005年，華東地區(qū)漁藥引起的死魚事