腫瘤相關(guān)micrornas的研究進展

1、<p>　　腫瘤相關(guān)microRNAs的研究進展</p><p><b>　　楊洋，孫益峰，高文</b></p><p>　　作者單位：200030 上海，上海交通大學(xué)附屬胸科醫(yī)院胸外科</p><p>　　E-mail: yangyang321879@163.com</p><p>　　通信作者：高文，E-m

2、ail：gaowen5921@163.com</p><p>　　【摘 要】 MicroRNAs（miRNAs）為小分子非編碼單鏈RNA片段，約22～24個核苷酸長度，通過與綁定的mRNA 3’ 端非翻譯區(qū)的堿基配對調(diào)控mRNAs的翻譯和降解，在基因表達的轉(zhuǎn)錄后調(diào)控中發(fā)揮功能。miRNAs 可參與生命過程中的一系列重要進程，包括早期胚胎發(fā)育、細胞增殖、細胞凋亡，甚至可通過miRNAs 途徑調(diào)節(jié)干細胞的分化。異常m

3、iRNAs表達與腫瘤等許多疾病密切相關(guān)，自2002年首先發(fā)現(xiàn)miRNAs表達異常與腫瘤有關(guān)以來，關(guān)于miRNAs在腫瘤發(fā)生和耐藥產(chǎn)生中的重要作用得到了迅速的發(fā)展。然而，全面認識了解miRNAs及其與人類腫瘤的關(guān)系仍有很長的路要走。本文簡要對miRNAs生物起源以及在腫瘤發(fā)生和耐藥性形成中的作用進行綜述，闡述了miRNAs作為分子標(biāo)志物或者新型的治療手段在腫瘤治療中的作用。</p><p>　　【關(guān)鍵詞】 微小RN

4、A，腫瘤，分子標(biāo)志物</p><p>　　The Research Progress of Cancer-related MicroRNAs</p><p>　　YANG Yang, SUN Yi-feng, GAO Wen</p><p>　　*Department of Thoracic Surgery, Shanghai Chest Hospital Affi

5、liated Shanghai Jiaotong University, Shanghai, 200030, China</p><p>　　Correeponding author: GAO Wen, E-mail: gaowen5921@163.com</p><p>　　【Abstract】 MicroRNAs (miRNAs) are a family of small non-c

6、oding RNAs with a length of 22~24 nucleotides, involved in posttranscriptional regulation of gene expression through an complementary matching with the 3’UTR of target mRNAs, leading to either mRNA degradation or transla

7、tional repression. miRNAs have an important role in all biological processes such as embryogenesis, cell proliferation, apoptosis and even in stem cell differentiation. Aberrant miRNAs expression is associated with many

8、dis</p><p>　　【Key Words】 microRNA, cancer, biomarker</p><p>　　1. miRNAs簡介</p><p>　　miRNAs 是一類高度保守，長度很短的非編碼調(diào)控單鏈RNA，長度約22 ～ 24 nt（核苷酸），在幾乎所有的生物過程中起著重要的作用。1993 年，Lee RC等對秀麗隱桿線蟲（Caenorh

9、abditis elegans）的發(fā)育過程研究中首次發(fā)現(xiàn)其異時性基因lin-4是一種小分子的非編碼RNA（ncRNA）[1]。2000年，Reinhart BJ等研究發(fā)現(xiàn)秀麗隱桿線蟲基因let-7和lin-4能夠調(diào)節(jié)基因表達過程[2]。自此，越來越多的研究中心將目光聚集于這些小分子非編碼RNA上，證實了大量具有調(diào)節(jié)功能的小分子非編碼RNA的存在，并稱之為miRNAs[3]。通常，miRNAs在細胞核內(nèi)由RNA 聚合酶（RNApolⅡ）指

10、導(dǎo)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生為初始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，然后經(jīng)過細胞核和胞質(zhì)內(nèi)多步驟加工成熟，成熟的miRNAs被整合于RNA誘導(dǎo)沉默復(fù)合物（RISC）并誘發(fā)靶基因轉(zhuǎn)錄后沉默[4]。</p><p>　　根據(jù)2014年公布的miRNA數(shù)據(jù)庫（miRBase）顯示，在人類有超過2588個成熟miRNA，而在鼠類大約存在1915個。目前認為miRNAs調(diào)節(jié)大約60%的人類基因，在細胞周期調(diào)控、凋亡、代謝、生長和分化等生物過程中發(fā)揮功能，亦參與神經(jīng)

11、退化性病變、代謝紊亂、腫瘤等疾病的發(fā)生發(fā)展。2002年，Calin GA等通過對慢性淋巴細胞白血?。–LL）患者的染色體13q14研究發(fā)現(xiàn)這一區(qū)域存在表達于同一多順反子RNA中的兩個重要miRNA基因—miR-15a和miR-16-1，這兩個miRNA的缺失導(dǎo)致惰性CLL的發(fā)生，從而首次提出了miRNAs異常表達與腫瘤之間的聯(lián)系[5]。大量關(guān)于腫瘤研究的數(shù)據(jù)證實，在大多數(shù)腫瘤的發(fā)生和發(fā)展中都存在miRNAs的表達和調(diào)控異常[6]。miR

12、NAs可以調(diào)控增殖、凋亡、轉(zhuǎn)移和浸潤等腫瘤相關(guān)過程[7.8]，最近的研究表明miRNAs在干細胞分化中具有關(guān)鍵作用，能夠調(diào)節(jié)腫瘤干細胞的形成以及上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化表型的獲得，因而也與腫瘤耐藥性的產(chǎn)生密切相關(guān)[9]。</p><p>　　miRNAs是非常強大的調(diào)控分子，可以作用于數(shù)百種mRNAs， 一種miRNA異常表達能夠干擾多種細胞信號通路，顯著地影響腫瘤的發(fā)生和發(fā)展。過去十年間，大量的研究產(chǎn)生了miRNA表達譜，

13、可以幫助區(qū)別正常組織和腫瘤組織，以及區(qū)別同一類型腫瘤的不同亞型[10]；此外，由于在化療敏感和化療抵抗的腫瘤細胞中miRNAs的表達常常不同，因此miRNAs是預(yù)測腫瘤耐藥性及判斷預(yù)后的重要標(biāo)志物[11]。近來研究發(fā)現(xiàn)在不同類型腫瘤甚至早期階段可以在患者血清中檢測到表達程度不一的miRNAs，這些研究結(jié)果致力于將循環(huán)miRNAs作為腫瘤預(yù)防、早期診斷和預(yù)后判斷中潛在的臨床標(biāo)志物，為腫瘤預(yù)防和診斷開辟了新的領(lǐng)域[12]。最后，目前的研究轉(zhuǎn)

14、向于將miRNAs作為一種新型治療途徑，通過其干擾腫瘤形成和發(fā)展的分子機制而應(yīng)用于腫瘤的治療[13]。</p><p>　　2. miRNAs生物起源</p><p>　　miRNAs基因在進化過程中高度保守，定位于能潛在編碼其前體發(fā)夾結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)非編碼區(qū)域，由RNA聚合酶Ⅱ在基因組不同區(qū)域轉(zhuǎn)錄形成較長的初始產(chǎn)物pri-miRNA[14]，pri-miRNA一般具有帽子結(jié)構(gòu)和多聚腺苷酸尾巴

15、，在細胞核內(nèi)被RNA 酶Ⅲ-Drosha 剪切成為為具有莖環(huán)結(jié)構(gòu)的長度約70 nt 的miRNA 前體( pre-miRNA) ，隨后通過輸出蛋白-5和Ran-GTP轉(zhuǎn)運到細胞漿，再由RNA 酶Ⅲ-Dicer 加工成為長度大約22 nt 的瞬時miRNA 雙體，在解螺旋鏈的作用下分離，其中一條鏈通過未知RNA 酶被降解，而另一條鏈保留成為成熟的miRNA。成熟miRNA與Argonaute蛋白以及Dicer結(jié)合，參與構(gòu)成效應(yīng)復(fù)合物—RN

16、A 誘導(dǎo)沉默復(fù)合物( RNA—induced silencing complex，RISC)。miRNAs通過與其目標(biāo)mRNA 的3’ UTR（非編碼區(qū)）結(jié)合，誘導(dǎo)mRNA降解或者產(chǎn)生翻譯抑制來負性調(diào)控基因的表達，miRNAs這一結(jié)合部位即所謂的“種子區(qū)域”，對于其功能發(fā)揮及靶向特異性非常重要。當(dāng)其與mRNA 不完全互補配對時，會產(chǎn)生翻譯</p><p>　　3. miRNAs表達異常和腫瘤發(fā)生與發(fā)展</p

17、><p>　　Calin GA等2002年首次揭示了miRNAs表達異常與腫瘤之間的關(guān)系，他們發(fā)現(xiàn)了miR-15a/miR-16-1在慢性淋巴細胞白血病（CLL）中常常發(fā)生缺失[5]，從而認為這兩個miRNAs具有腫瘤抑制基因的活性。此后，大量的miRNAs被證實在腫瘤細胞中表達異常，通常其表達水平比正常組織低，但是也有在腫瘤中表達水平升高的miRNAs，表明不同的miRNAs在不同類型組織中可能發(fā)揮不同的作用。Su

18、n Y等證實miR-3127-5p在非小細胞肺癌（NSCLC）中表達水平降低，通過作用于c-Abl/Ras/ERK分子通路而影響腫瘤細胞的增殖、轉(zhuǎn)移能力以及對達沙替尼的敏感性[16]。</p><p>　　近年來，多數(shù)研究團隊致力于探究在腫瘤發(fā)生和發(fā)展中引起miRNAs異常表達的原因。2004年，Calin GA及其同事提出：大部分的miRNAs 在基因組上定位于與腫瘤相關(guān)的脆性位點（fragile site）；

19、大約一半miRNAs的基因組區(qū)域在腫瘤中發(fā)生了改變[17]。正如前面提到的第一個被發(fā)現(xiàn)的與腫瘤有關(guān)的miRNAs異常表達， miR-15a/miR-16-1所在的位于外顯子2和外顯子5之間的基因結(jié)構(gòu)域在CLL中常常發(fā)生缺失。另外一種可能引起miRNAs表達異常并導(dǎo)致腫瘤的機制是miRNAs生物起源過程相關(guān)酶（如Drosha、Dicer）的表達或功能發(fā)生改變。例如，Merritt WM等發(fā)現(xiàn)在39%的卵巢癌患者中Drosha和Dicer的

20、表達水平下降[18]。miRNAs啟動子異常的表觀遺傳改變?nèi)绨l(fā)生甲基化或者組蛋白模式變化，亦可引起miRNAs表達水平的異常[19]。Saito Y等報道了抑癌基因發(fā)生表觀遺傳改變在腫瘤中的作用，如原發(fā)性前列腺癌和膀胱癌中抑癌基因miR-127的抑制導(dǎo)致其目標(biāo)基因—原癌基因BCL-6的表達上調(diào)[20]。miRNAs也可以在通過改變與表觀遺傳調(diào)控有關(guān)</p><p>　　轉(zhuǎn)錄調(diào)控是miRNAs表達的另一個重要且復(fù)雜

21、的調(diào)節(jié)機制，促癌基因MYC誘發(fā)的miR-17/92轉(zhuǎn)錄后激活是第一個發(fā)現(xiàn)的與腫瘤相關(guān)的miRNAs表達的轉(zhuǎn)錄調(diào)控，上調(diào)的miR-17/92調(diào)節(jié)抗凋亡因子E2F1的活性，進而介導(dǎo)MYC基因的促增殖效應(yīng)[22]。由于p53丟失是大多數(shù)腫瘤中存在的基因異常，miR-34a家族與p53之間的聯(lián)系是miRNAs轉(zhuǎn)錄調(diào)控又一重要例子。P53刺激miR-34a家族基因的轉(zhuǎn)錄，誘導(dǎo)凋亡和衰老，在p53突變的絕大部分卵巢癌患者中，p53功能的丟失引起mi

22、R-34a家族表達下降而導(dǎo)致凋亡不足，造成腫瘤發(fā)生[23]。Acunzo M等發(fā)現(xiàn)，肝細胞生長因子受體c-MET可以通過轉(zhuǎn)錄因子AP1而引起促癌性miR-221/222表達的上調(diào)和miR-27a的負反饋調(diào)控，發(fā)揮轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用[24]。</p><p>　　4. miRNAs和腫瘤耐藥性</p><p>　　外科手術(shù)、化療和放療是腫瘤治療的主要手段，特別是化療對于減慢腫瘤細胞生長和延緩轉(zhuǎn)移進

23、展常常有一定的效果。然而，由于耐藥性的產(chǎn)生常常導(dǎo)致化療抵抗，尤其在進展期腫瘤，造成腫瘤轉(zhuǎn)移至遠處器官或者短期復(fù)發(fā)。有些miRNAs在抗藥性產(chǎn)生時表達水平可以升高數(shù)倍，如miR-19、miR-21、miR-221/222[25.26.27]；相反，另外一些miRNAs如miR-130a、miR-298表達水平則可以降低[28.29]；還有一些情況下，miRNAs在耐藥性中的作用是組織特異性的，如miR-27a在卵巢癌中與藥物敏感性無關(guān)，而

24、在白血病中卻直接參與了腫瘤耐藥的產(chǎn)生[30]；這些都表明了miRNAs在腫瘤耐藥性產(chǎn)生中的重要生物作用。 </p><p>　　miRNAs也可以影響藥物作用分子靶向物的表達水平，例如在NSCLC中miR-126直接作用于血管生成抑制劑貝伐單抗的靶作用物血管內(nèi)皮生長因子A（VEGF-A），從而恢復(fù)貝伐單抗耐藥腫瘤細胞的藥物敏感性[31]。某些時候，miRNAs通過作用于藥物靶向蛋白通路的下游效應(yīng)器而賦予腫瘤細胞耐

25、藥性，例如miR-17、miR-21、miR-144、miR-221/222和miR-214，作用于PTEN，激活PI3K/AKT信號通路，阻斷了藥物對EGFR的抑制作用，從而產(chǎn)生耐藥性。在NSCLC中，miR-494通過下調(diào)BIM引起TRAIL抵抗[32]；miR-130a通過AP1介導(dǎo)miR-221/222表達下調(diào)而誘導(dǎo)TRAIL耐藥性產(chǎn)生[28]。這些結(jié)果表明，miRNAs促使耐藥性的產(chǎn)生不僅可以通過作用于某些蛋白，也可以通過調(diào)節(jié)

26、下游效應(yīng)器或者影響其他miRNAs的表達而實現(xiàn)。</p><p>　　5. miRNAs作為分子標(biāo)志物</p><p>　　過去10年間大量的文獻報道證實了miRNAs參與幾乎所有類型的腫瘤形成和發(fā)展。微陣列分析和新一代測序等技術(shù)的出現(xiàn)，使得我們可以通過對腫瘤中這一類型的小分子非編碼RNAs的全部表達譜進行檢測，從而更深一步地認識miRNAs與腫瘤之間的相關(guān)性。2006年，Volonia

27、S等利用微陣列分析，通過比較正常組織和腫瘤組織中miRNAs的表達，獲得了6種類型實體腫瘤的miRNAs表達特征，并且揭示了“在腫瘤中miRNAs表達水平都是降低的”這一觀點是錯誤的，例如miR-21、miR-17-5p和miR-191在有些腫瘤中表達是升高的[33]。此后，逐漸提出了更加準(zhǔn)確和靈敏的miRNAs表達譜，同時顯示miRNAs某些表達特征可以反映腫瘤類型的胚胎或發(fā)展起源，有利于依據(jù)miRNAs表達進行腫瘤分類。Rosenf

28、eld N等對22種不同類型腫瘤的研究表明，利用miRNAs表達譜可以按照組織來源將腫瘤進行分類，準(zhǔn)確度高于90%[10]。</p><p>　　Pencheva N等認為miRNAs在腫瘤進展過程中也具有一定的作用，可能有利于腫瘤轉(zhuǎn)移的預(yù)測[34]。Png KJ等在乳腺癌中發(fā)現(xiàn)某些miRNAs表達異常與腫瘤轉(zhuǎn)移過程相關(guān)，可以作為有效的分子標(biāo)志物[35]。Drusco A等近來對82名結(jié)腸癌患者的miRNAs表達

29、譜進行分析，發(fā)現(xiàn)根據(jù)腫瘤miRNAs表達特征有助于區(qū)分結(jié)腸癌淋巴結(jié)復(fù)發(fā)或者肝臟復(fù)發(fā)，以及鑒別肝臟腫瘤來源于結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移或者原發(fā)性肝癌[36]。</p><p>　　盡管目前miRNAs尚未應(yīng)用于臨床治療的選擇，但是在許多不同的研究中都將其作為選擇治療方法的分子標(biāo)志物。例如，在慢性粒細胞白血病（CML）的診斷和治療過程中，miR-451的表達水平與BCR-ABL重排水平負相關(guān)，可以被用于調(diào)整治療方案以獲得更好的預(yù)后

30、[37]。</p><p>　　最近，有關(guān)循環(huán)miRNAs的研究大量開展，miRNAs被證實存在于血液循環(huán)中，可以在血漿、血小板、紅細胞和有核細胞中被檢測到。血漿miRNAs被小分子顆粒包裹或者與RNA結(jié)合蛋白、脂蛋白復(fù)合物等結(jié)合，不受RNA酶（RNase）的消化，因而在不同的pH和溫度下仍能保持穩(wěn)定[38]。事實上，過去數(shù)年間，循環(huán)miRNAs已經(jīng)被應(yīng)用作為人類腫瘤的早期診斷的分子標(biāo)志物。通過對400例NSCL

31、C患者以及220例對照人群進行血清miRNAs篩選，發(fā)現(xiàn)有miR-20a等10個miRNAs在NSCLC患者血清中表達較對照組明顯不同，并在進一步的回顧性研究中得到了證實[39]。</p><p>　　6. miRNAs在腫瘤治療中的作用 </p><p>　　近年來，盡管腫瘤的藥物治療提高了患者生存率并且降低了總體死亡率，然而，我們?nèi)云惹行枰芯堪l(fā)展更具靶向特異性的新型藥物。miRNAs

32、應(yīng)用于腫瘤治療是通過干擾腫瘤的分子機制產(chǎn)生作用，是一種新穎的、有前途的治療方法。</p><p>　　一種方法是通過將單個或多個模擬miRNAs引入與某一類型腫瘤中，重新建立腫瘤細胞中miRNAs正常表達譜并恢復(fù)其喪失的功能，從而發(fā)揮miRNAs在腫瘤治療中的作用。隨著計算機工具的發(fā)展，可以設(shè)計同時靶向作用于不同基因的多位點人工miRNAs（amiRNAs）[40]，聯(lián)合納米顆粒和病毒系統(tǒng)等能夠運輸小分子RNA的

33、有效載體，極大地促進了miRNAs治療的成功應(yīng)用。miRNAs治療的另一種方法是，使用miRNAs拮抗劑抑制促癌性miRNAs的表達，這些抗-miRs或者miRNAs拮抗劑是大約21-23 nt的單鏈RNA分子，與目標(biāo)miRNAs互補配對發(fā)揮抑制作用。</p><p>　　然而，模擬miRNAs應(yīng)用于腫瘤治療中的效果仍存在某些不確定性，例如腫瘤細胞具有通過激活其他通路而從治療誘導(dǎo)的通路改變中恢復(fù)的能力是miRNA

34、s治療途徑的障礙之一；另外一個問題是這些miRNAs分子的體內(nèi)轉(zhuǎn)運，最好的方法是根據(jù)腫瘤特異性利用可以運輸siRNAs和miRNAs的納米顆粒進行體內(nèi)轉(zhuǎn)運[41]，但是，腫瘤特異性納米顆粒運輸系統(tǒng)目前仍在研究中，不同的納米顆粒類型對人體的影響尚不明清楚。</p><p><b>　　小結(jié)</b></p><p>　　過去數(shù)十年間，大量的研究發(fā)現(xiàn)了不同類型的非編碼RNA

35、并根據(jù)其功能和大小進行分類。miRNAs是一類小分子非編碼RNA，在許多生物過程以及腫瘤等疾病中具有重要的作用。自從發(fā)現(xiàn)miR-15和miR-16異常表達和CLL之間的關(guān)系后，越來越多的研究證實了miRNAs表達異常與腫瘤之間的相關(guān)性，認識了某些異常表達的miRNAs在腫瘤細胞增殖、凋亡、浸潤、轉(zhuǎn)移和耐藥性產(chǎn)生等過程中的作用。近來，腫瘤研究熱點之一是利用miRNAs作為預(yù)后判斷的分子標(biāo)志物，對于多種類型腫瘤miRNAs表達譜的研究促進了

36、腫瘤早期診斷以及耐藥性預(yù)測的快速發(fā)展；通過新型計算機方法設(shè)計人工miRNAs以及利用腫瘤特異性納米顆粒作為運輸系統(tǒng)也得到了一定程度的發(fā)展，代表了miRNAs腫瘤治療的新前沿。盡管如此，全面認識miRNAs與腫瘤的關(guān)系以及將miRNAs應(yīng)用于腫瘤臨床治療仍有待進一步研究。</p><p><b>　　參考文獻</b></p><p>　　1. Lee RC, Feinb

37、aum RL, Ambros V. The C. elegans heterochronic gene lin-4 encodes small RNAs with antisense complementarity to lin-14. Cell, 1993, 75: 843-854.</p><p>　　2. Reinhart BJ, Slack FJ, Basson M, et al. The 21-nucl

38、eotide let-7 RNA regulates developmental timing in Caenorhabditis elegans. Nature, 2000, 403: 901-906.</p><p>　　3. Lagos-Quintana M, Rauhut R, Lendeckel W, et al. Identification of novel genes coding for sma

39、ll expressed RNAs. Science, 2001, 294: 853-858.</p><p>　　4. Bartel DP. MicroRNAs: target recognition and regulatory functions. Cell, 2009, 136: 215-233.</p><p>　　5. Calin GA, Dumitru CD, Shimizu

40、 M, et al. Frequent deletions and down-regulation of micro-RNA genes miR15 and miR16 at 13q14 in chronic lymphocytic leukemia. Proc Natl Acad Sci U S A, 2002, 99: 15524-15529.</p><p>　　6. Croce CM. Causes an

41、d consequences of microRNA dysregulation in cancer. Nat Rev Genet, 2009, 10: 704-714.</p><p>　　7. Hwang HW, Mendell JT. MicroRNAs in cell proliferation, cell death, and tumorigenesis. Br J Cancer, 2006, 94:

42、776-780.</p><p>　　8. Baranwal S, Alahari SK. miRNA control of tumor cell invasion and metastasis. Int J Cancer, 2010, 126: 1283-1290.</p><p>　　9. Heinrich EM, Dimmeler S. MicroRNAs and stem cell

43、s control of pluripotency, reprogramming, and lineage commitment. Circ Res, 2012, 110: 1014-1022.</p><p>　　10. Rosenfeld N, Aharonov R, Meiri E, et al. MicroRNAs accurately identify cancer tissue origin. Nat

44、 Biotechnol, 2008, 26: 462-469.</p><p>　　11. Ma J, Dong C, Ji C. MicroRNA and drug resistance. Cancer Gene Ther, 2010, 17: 523-531.</p><p>　　12. Martina Redova, Jiri Sana, Ondrej Slaby. Circulat

45、ing miRNAs as new blood-based biomarkers for solid cancers. Future Oncol, 2013, 9: 387–402.</p><p>　　13. Bader AG, Brown D, Stoudemire J, et al. Developing therapeutic microRNAs for cancer. Gene Ther, 2011,

46、18: 1121-1126.</p><p>　　14. Lee Y, Kim M, Han J, et al. MicroRNA genes are transcribed by RNA polymerase II. EMBO J, 2004, 23: 4051-4060.</p><p>　　15. Bartel DP. MicroRNAs: genomics, biogenesis,

47、 mechanism, and function. Cell, 2004, 116: 281-297.</p><p>　　16. Sun Y, Chen C, Zhang P, et al. Reduced miR-3127-5p expression promotes NSCLC proliferation/invasion and contributes to dasatinib sensitivity v

48、ia the c-Abl/Ras/ERK pathway. Scientific Reports, 2014, 4: 6527.</p><p>　　17. Calin GA, Sevignani C, Dumitru CD, et al. Human microRNA genes are frequently located at fragile sites and genomic regions involv

49、ed in cancers. Proc Natl Acad Sci U S A, 2004, 101: 2999-3004.</p><p>　　18. Merritt WM, Lin YG, Han LY, et al. Dicer, Drosha, and outcomes in patients with ovarian cancer. N Engl J Med, 2008, 359: 2641-2650.

50、</p><p>　　19. Fabbri M, Calore F, Paone A, et al. Epigenetic regulation of miRNAs in cancer. Adv Exp Med Biol, 2013, 754: 137-148.</p><p>　　20. Saito Y, Liang G, Egger G, et al. Specific activat

51、ion of microRNA-127 with downregulation of the proto-oncogene BCL6 by chromatin-modifying drugs in human cancer cells. Cancer Cell, 2006, 9: 435-443.</p><p>　　21. Fabbri M, Garzon R, Cimmino A, et al. MicroR

52、NA-29 family reverts aberrant methylation in lung cancer by targeting DNA methyltransferases 3A and 3B. Proc Natl Acad Sci U S A, 2007, 104: 15805-15810.</p><p>　　22. O'Donnell KA, Wentzel EA, Zeller KI,

53、 et al. c-Myc-regulated microRNAs modulate E2F1 expression. Nature, 2005, 435: 839-843.</p><p>　　23. Corney DC, Flesken-Nikitin A, Godwin AK, et al. MicroRNA-34b and microRNA-34c are targets of p53 and coope

54、rate in control of cell proliferation and adhesion-independent growth. Cancer Res, 2007, 67: 8433-8438.</p><p>　　24. Acunzo M, Romano G, Palmieri D, et al. Cross-talk between MET and EGFR in non-small cell l

55、ung cancer involves miR-27a and Sprouty2. Proc Natl Acad Sci U S A, 2013, 110: 8573-8578.</p><p>　　25. Liang Z, Li Y, Huang K, et al. Regulation of miR-19 to breast cancer chemoresistance through targeting P

56、TEN. Pharm Res, 2011, 28: 3091-3100.</p><p>　　26. Shi GH, Ye DW, Yao XD, et al. Involvement of microRNA-21 in mediating chemo-resistance to docetaxel in androgen-independent prostate cancer PC3 cells. Acta P

57、harmacol Sin, 2010, 31: 867-873.</p><p>　　27. Garofalo M, Di Leva G, Romano G, et al. miR-221&222 regulate TRAIL resistance and enhance tumorigenicity through PTEN and TIMP3 downregulation. Cancer Cell,

58、2009, 16: 498-509.</p><p>　　28. Acunzo M, Visone R, Romano G, et al. miR-130a targets MET and induces TRAIL-sensitivity in NSCLC by downregulating miR-221 and 222. Oncogene, 2012, 31: 634-642.</p><

59、;p>　　29. Bao L, Hazari S, Mehra S, et al. Increased expression of P-glycoprotein and doxorubicin chemoresistance of metastatic breast cancer is regulated by miR-298. Am J Pathol, 2012, 180: 2490-2503.</p><p

60、>　　30. Zhu H, Wu H, Liu X, et al. Role of microRNA miR-27a and miR-451 in the regulation of MDR1/Pglycoprotein expression in human cancer cells. Biochem Pharmacol, 2008, 76: 582-588.</p><p>　　31. Zhu X, L

61、i H, Long L, et al. miR-126 enhances the sensitivity of non-small cell lung cancer cells to anticancer agents by targeting vascular endothelial growth factor A. Acta Biochim Biophys Sin, 2012, 44: 519-526.</p><

62、;p>　　32. Romano G, Acunzo M, Garofalo M, et al. MiR-494 is regulated by ERK1/2 and modulates TRAILinduced apoptosis in non-small-cell lung cancer through BIM down-regulation. Proc Natl Acad Sci U S A, 2012, 109: 16570

63、-16575.</p><p>　　33. Volinia S, Calin GA, Liu CG, et al. A microRNA expression signature of human solid tumors defines cancer gene targets. Proc Natl Acad Sci U S A, 2006, 103: 2257-2261.</p><p>

64、;　　34. Pencheva N, Tavazoie SF. Control of metastatic progression by microRNA regulatory networks. Nat Cell Biol, 2013, 15: 546-554.</p><p>　　35. Png KJ, Halberg N, Yoshida M, et al. A microRNA regulon that

65、mediates endothelial recruitment and metastasis by cancer cells. Nature, 2011, 481: 190-194.</p><p>　　36. Drusco A, Nuovo GJ, Zanesi N, et al. MicroRNA profiles discriminate among colon cancer metastasis. PL

66、oS One, 2014, 9: e96670.</p><p>　　37. Scholl V, Hassan R, Zalcberg IR. miRNA-451: a putative predictor marker of Imatinib therapy response in chronic myeloid leukemia. Leuk Res, 2012, 36: 119-121.</p>

67、<p>　　38. Creemers EE, Tijsen AJ, Pinto YM. Circulating microRNAs: novel biomarkers and extracellular communicators in cardiovascular disease? Circ Res, 2012, 110: 483-495.</p><p>　　39. Chen X, Hu Z, W

68、ang W, et al. Identification of ten serum microRNAs from a genome-wide serum microRNA expression profile as novel non-invasive biomarkers for non-small cell lung cancer diagnosis. Int J Cancer, 2012, 130: 1620-1628.</

69、p><p>　　40. Lagana A, Acunzo M, Romano G, et al. miR-Synth: a computational resource for the design of multi-site multi-target synthetic miRNAs. Nucleic Acids Res, 2014, 42: 5416-5425.</p><p>　　41.