皖南黃肉種雞ALV-J與REV的共感染及其分子變異分析.pdf

1、J 亞群禽白血病病毒（Avian Leukosis virus subgroup J）和禽網(wǎng)狀內(nèi)皮增生病病毒（Reticuloendotheliosis virus）都是能引起禽類腫瘤和免疫抑制的疾病。這類疾病雖然不一定直接導(dǎo)致禽的死亡，但他們能降低雞體對其他疾病的抵抗力，進而給養(yǎng)殖業(yè)帶來很大的經(jīng)濟損失。ALV-J是上世紀(jì)80年代末Payne L N等首先從肉用型雞中分離鑒定出來的禽白血病病毒新的亞群,所致腫瘤多為骨髓樣細(xì)胞瘤。REV

2、同樣作為反轉(zhuǎn)錄病毒感染自然宿主后，大多情況下也不會對機體細(xì)胞造成損害，但某些情況下會導(dǎo)致細(xì)胞轉(zhuǎn)化（瘤細(xì)胞化）或引起細(xì)胞病變。
　　 REV和ALV-J 已在包括中國在內(nèi)的世界范圍內(nèi)同時流行，并且呈現(xiàn)與其它致瘤性病毒如馬立克氏病病毒（MDV）等共感染或多重感染的流行特點，并且REV 與ALV-J 無論人工混合感染還是自然混合感染的病例均出現(xiàn)非典型的病變，其病變程度和死亡率較任何單一病毒的感染要嚴(yán)重的多，且在其感染期間致使雞體極易受

3、到其它病原的侵襲并常常伴有其它病原的共感染以及多重感染，進而給養(yǎng)禽業(yè)帶來了巨大的損失，是危害養(yǎng)禽業(yè)的主要病原體之一。因此，對REV 與ALV-J 共感染相關(guān)的研究越深入越有利于實踐生產(chǎn)中對該病的預(yù)防和治療。
　　 近年來，安徽許多雞場地方品種皖南黃肉種雞先后發(fā)生了病因不名的腫瘤性疾病,其發(fā)病率和死亡率比以前的腫瘤性疾病顯著提高，而且根據(jù)病理檢查很難作出確切的鑒別診斷。為了弄清楚這種腫瘤病的病因和發(fā)病機理，我們采集了疑似發(fā)病皖南黃

4、肉種雞樣本，對此進行了一系列實驗室的診斷,結(jié)果從發(fā)生腫瘤病的病雞體內(nèi)同時分離到了ALV-J和禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥病毒(REV)。為了探討地方品種皖南黃肉種雞群中禽網(wǎng)狀內(nèi)皮增生病病毒（REV）與ALV-J的感染狀態(tài)，對ALV-J分離株的囊膜糖蛋白基因（env）和非編碼區(qū)3'UTR序列進行分子變異分析。
　　 本實驗首先取7 只300d 皖南黃發(fā)病雞分別進行病理組織學(xué)、細(xì)胞培養(yǎng)后的IFA 檢測。參照GenBank上發(fā)表的ALV-J

5、原型毒株HPRS-103、ALV-A 原型毒株ALV-RSA、ALV-B毒株和REV 毒株HA9901序列，設(shè)計合成用于擴增ALV-env/LTR的引物，特異性引物序列進行PCR 鑒別診斷。結(jié)果表明,7 只皖南黃肉種雞有6 只同時感染ALV-J 與REV，而ALV-A和ALV-B 為陰性。取2個ALV-J分離株WN100401和WN100402 進行env基因與非編碼區(qū)3'UTR基因擴增與序列分析，結(jié)果顯示兩分離株的env 全長均為17

6、04 bp，gp85與12 株國內(nèi)外參考株之間的氨基酸同源性在89.2％～93.7％之間，跟廣東株GD051001的同源性最高93.7％，gp37 同源性在88.9％～93.4％之間；3'UTR 全長均為400bp,3'UTR 區(qū)段rTM和E 元件同發(fā)生雙缺失；與近十年國內(nèi)來自白羽肉雞的ALV-J分離株，所有分離株3'UTR-E 元件基因缺失表現(xiàn)為共性，但3'UTR-rTM基因缺失呈現(xiàn)多樣性；作為保守序列5'LTR 較之前所有國內(nèi)外毒株