不同輻照劑量對蜜蜂球囊菌的殺滅效果.pdf

1、養(yǎng)蜂業(yè)是我國農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的一個重要有機組成部分，但蜜蜂的生長繁殖一直受到各種病原微生物特別是蜜蜂白堊病的危害。蜜蜂白堊病是由蜜蜂球囊菌感染而引起蜜蜂幼蟲死亡的真菌性傳染病，20世紀90年代初開始在我國暴發(fā)流行，以后時有發(fā)生，給我國的養(yǎng)蜂生產(chǎn)造成了嚴重危害。但非常遺憾的是，到目前為止,至今沒有有效的防控方法。研究發(fā)現(xiàn)，市售蜂花粉中常含有蜜蜂球囊菌，養(yǎng)蜂場在購買此類花粉作為蜜蜂飼料后，蜂群易患白堊病，通過60Co輻照殺滅蜂花粉中的蜜蜂球囊菌是切

2、斷白堊病傳播途徑的有效手段，而目前輻照劑量并不明確，導(dǎo)致輻照效果參差不齊。本研究以蜜蜂球囊菌為研究對象，探究不同輻照劑量對蜜蜂球囊菌的殺滅效果，以期明確有效殺滅蜜蜂球囊菌的最低輻照劑量，為60Co輻照蜜蜂飼料（特別是蜂花粉）時的輻照劑量選擇提供依據(jù)。
　　本研究利用細菌純化技術(shù)從患白堊病(Bee Chalkbrood Disease)的意大利蜜蜂幼蟲體內(nèi)分離純化得到蜜蜂球囊菌(Ascosphaera apis)，并結(jié)合形態(tài)學(xué)、乳酸

3、酚棉蘭染色以及5.8S rDNA序列分析技術(shù)進行鑒定。同時制備不同梯度濃度的A.apis孢子懸液加入到幼蟲飼料中，對3日齡意蜂幼蟲體外接種試驗，利用人工飼養(yǎng)蜜蜂幼蟲技術(shù)，統(tǒng)計幼蟲患病率，通過寇式法計算得出蜜蜂球囊菌對意大利蜜蜂幼蟲的半數(shù)致死濃度，對添加半數(shù)致死濃度的孢子的飼料進行不同劑量輻照處理并進行侵染意大利蜜蜂幼蟲實驗，最終確定對添加半數(shù)致死濃度的蜜蜂球囊菌孢子飼料的最低有效輻照劑量。
　　試驗結(jié)果表明:從患白堊病的意大利蜜蜂

4、幼蟲體內(nèi)分離純化得到蜜蜂球囊菌的菌落形態(tài)與文獻報道一致;顯微鏡下觀察其孢囊直徑，孢子球直徑和孢子的長寬比等形態(tài)特征與文獻報道相同或接近;對分離純化的蜜蜂球囊菌進行分子鑒定，擴增片段大小符合理論值，經(jīng)與GenBank所公布的蜜蜂球囊菌特異性片段序列做blast對比，重合度99％;計算得出蜜蜂球囊菌對人工飼養(yǎng)條件下的意蜂幼蟲的半數(shù)致死濃度為5.6×104個/ml;經(jīng)60Co對添加半數(shù)致死濃度的蜜蜂球囊菌孢子飼料進行輻照后飼喂幼蟲，在7.0k