25820.柔嫩艾美耳球蟲抗藥株的基因重組法選育及耐藥性相關(guān)基因研究

1、上海師范大學碩士學位論文柔嫩艾美耳球蟲抗藥株的基因重組法選育及耐藥性相關(guān)基因研究姓名：郭濤申請學位級別：碩士專業(yè)：動物學指導教師：黃兵20100301上海師范大學碩士學位論文摘要根據(jù)差異表達基因的ESTs序列，利用RACE技術(shù)，擴增獲得了3個與耐藥性相關(guān)新基因(M20、E2、H3)的全長cDNA，其中耐藥株表達上調(diào)基因2個，下調(diào)基因1個。利用生物信息學分析軟件對新基因編碼蛋白的理化性質(zhì)、信號肽、跨膜結(jié)構(gòu)、疏水性、保守功能域及同源性等進行

2、了分析預測。M20編碼的蛋白分子量約為19kDa，無跨膜結(jié)構(gòu)，無信號肽，與剛地弓形蟲(ToxoplasmagondiiGTI)的胰島素降解酶在31477位氨基酸間具有45％的同源性；該基因在耐藥株中表達上調(diào)，推測其通過降解胰島素而阻礙胞外陽離子進入胞內(nèi)，而使藥物失效。E2編碼的蛋白分子量約32kDa，具有1個跨膜結(jié)構(gòu)、1個信號肽和1個DUF477超家族蛋白保守功能域，與Toxoplasmagondii種保守假定蛋白在31285位氨基酸間

3、具有36％的同源性；該基因在耐藥株中表達下調(diào)，功能有待進一步研究。H3編碼蛋白分子量約36kDa，無跨膜結(jié)構(gòu)，具有1個信號肽和1個層粘連蛋白G超家族保守功能域，與Toxoplasmagondii一種保守假定蛋白在10340位氨基酸間具有65％的同源性；該基因在耐藥株中表達上調(diào)，推測其促進蟲體進入宿主細胞，減少高濃度藥物對蟲體的傷害，而使藥物失效。綜上，本文所采用的基因重組法為球蟲表型的遺傳學研究提供了重要思路，而對耐藥性相關(guān)基因的克隆研