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文檔簡介
1、目的:脊髓小腦性共濟失調3型/馬查多-約瑟夫疾病(spinocerebellarataxia type3/Machado-Joseph disease,SCA3/MJD),是一種因致病基因MJD1編碼區(qū)內CAG異常重復擴增所致的常染色體顯性遺傳的遲發(fā)性神經退行性疾病。已知過表達PINK1蛋白可通過抗氧化穩(wěn)定線粒體挽救帕金森疾病模型,但其在SCA3/MJD疾病模型中的作用尚不清楚。本文旨在探索過表達PINK1對SCA3/MJD轉基因果蠅模
2、型的線粒體功能保護作用。
方法:根據(jù)Gal4-UAS系統(tǒng),本研究利用在果蠅間接飛行肌肉表達的Mhc-Gal4啟動子表達致病蛋白質片段(MJDtr-Q78),獲得Mhc-Gal4/UAS系統(tǒng)SCA3/MJD轉基因果蠅模型。分別運用過表達PINK1和RNA干擾PINK1干預SCA3/MJD轉基因果蠅模型,研究其在SCA3/MJD轉基因果蠅模型中的作用。通過對果蠅表型的觀察、果蠅線粒體形態(tài)的觀察、果蠅ATP值的檢測,Real-Tim
3、e PCR檢測PINK1 mRNA表達水平,分析比較過表達PINK1和RNA干擾PINK1對SCA3/MJD轉基因果蠅模型的影響。
結果:與正常對照組相比,疾病模型組翅膀異常率增高,線粒體呈過度融合狀態(tài),ATP值降低。與疾病模型組比較,RNA干擾PINK1干預疾病模型后,果蠅翅膀異常率明顯增高,線粒體呈顯著過度融合狀態(tài),ATP值明顯降低;過表達PINK1干預疾病模型后,果蠅翅膀異常率明顯降低,線粒體清晰、完整,ATP值明顯升高
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