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文檔簡介
1、綠膿桿菌是一種重要的院內(nèi)感染條件致病菌。它可以引起多種類型的感染，并多為天然耐多種抗生素菌株，感染后不易被控制。近年來，由于廣譜抗生素的大量使用以及藥物的聯(lián)合治療，導(dǎo)致了多藥耐藥株以及泛耐藥株的急速出現(xiàn)。因此，迫切需要發(fā)現(xiàn)新型低毒、高效抗綠膿桿菌藥物。
Sec（secretion pathway）途徑是細胞蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運中的主要途徑，SecA是Sec途徑中唯一已知的能量轉(zhuǎn)化酶，可通過水解循環(huán)驅(qū)使蛋白質(zhì)前體穿過細菌內(nèi)膜，是細菌所
2、獨有且不可缺少的。因此，本研究選擇SecA為藥物的靶點并建立相應(yīng)的藥物篩選模型，以期發(fā)現(xiàn)新型高效低毒的抗綠膿桿菌藥物。
本研究首先克隆和表達了PaSecAN68（綠膿桿菌SecA蛋白N端609個氨基酸殘基組成的片段，大小約68kDa）和PaSecAN75（綠膿桿菌SecA蛋白N端645個氨基酸殘基組成的片段，大小約75kDa）蛋白并研究其酶學性質(zhì)。選擇酶活較高的PaSecAN75作為靶酶，建立和優(yōu)化了兩種綠膿桿菌SecA
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