HCV感染者基線的肝組織學(xué)活動(dòng)指數(shù)、Treg、Th17細(xì)胞和IL28B基因型的特點(diǎn)及與快速病毒學(xué)應(yīng)答的相關(guān)性.pdf

1、目的:
　　分析慢性丙型肝炎病毒(hepatitis C virus，HCV)感染者基線的肝組織學(xué)活動(dòng)指數(shù)(histological activity index，HAI)、Treg、Th17細(xì)胞及IL28B rs12979860基因型的特點(diǎn);探討三者與抗HCV快速病毒學(xué)應(yīng)答(rapid virological response，RVR)可能的相關(guān)性。
　　方法:
　　收集2012年8月至2013年6月天津市第三中心醫(yī)

2、院門診診斷的慢性丙型肝炎患者63例，記錄臨床一般情況（年齡、性別、身高、體重、可能的感染途徑、既往病史、既往治療情況）、治療前臨床及影像學(xué)資料（血常規(guī)、肝腎功能、血糖、血脂、甲狀腺功能、抗核抗體、HCV RNA載量、HCV基因分型、IL28B rs12979860基因型、肝膽胰脾及雙腎B超）。留取63例HCV感染者及同期健康體檢者新鮮外周血標(biāo)本。按患者意愿行肝穿活檢組織檢查者33例，留取標(biāo)本。所有標(biāo)本取材均通過(guò)我院倫理委員會(huì)審核，家屬知

3、情同意并簽字。所有患者接受標(biāo)準(zhǔn)療法(standard of care，SOC)抗HCV治療，定期隨訪。
　　應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)63例慢性丙型肝炎(chronic hepatitis C，CHC)患者外周血CD3+T、CD4+T、CD8+T、CD4+CD25+Foxp3+Treg細(xì)胞頻率，并與23例健康對(duì)照(healthy control，HC)進(jìn)行比較。通過(guò)肝穿刺組織HE染色(Haematoxylin and eosin stai

4、n)評(píng)價(jià)HAI、肝臟炎癥壞死分級(jí)(grade，G)及纖維化分期(stage，S)。免疫組織化學(xué)染色法(immunohistochemistry，IHC)標(biāo)記肝穿組織中Foxp3+Treg細(xì)胞、IL17+Th細(xì)胞(Th17細(xì)胞)。
　　結(jié)果:
　　1.CHC組外周血CD4+T、CD4+/CD8+、CD4+CD25+Foxp3+Treg細(xì)胞頻率分別為(28.16±8.295)％、(0.87±0.392)％、(6.83±2.209

5、)％，均高于HC組的(23.57±5.492)％、(0.60±0.120)％、(4.86±0.740)％,P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;CHC組外周血CD3+T、CD8+T細(xì)胞頻率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　2.基線HCV RNA載量與浸潤(rùn)肝組織的Treg細(xì)胞低度正相關(guān)(r=0.353，P=0.047);與HAI、外周血T細(xì)胞亞群、浸潤(rùn)肝組織的Th17細(xì)胞、血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(alanine transaminase，ALT)水平

6、均無(wú)相關(guān)性。
　　3.HCV感染者基線ALT水平與浸潤(rùn)肝組織的Treg細(xì)胞呈低度負(fù)相關(guān)關(guān)系(r=-0.383，P=0.030);與外周血T細(xì)胞亞群、浸潤(rùn)肝臟的Th17細(xì)胞及HAI均無(wú)相關(guān)性。
　　4.HAI與浸潤(rùn)肝組織的Treg細(xì)胞低度負(fù)相關(guān)(r=-0.443，P=0.010)，與肝組織的Th17細(xì)胞低度正相關(guān)(r=0.404，P=0.020)，與外周血T細(xì)胞亞群無(wú)相關(guān)性。
　　5.隨著炎癥壞死分級(jí)的增加，肝組織Tre

7、g細(xì)胞數(shù)逐漸減少，肝組織Th17細(xì)胞數(shù)及HAI逐漸增加(P＜0.05）;而基線HCV RNA載量、ALT水平及外周血T細(xì)胞亞群，在各分級(jí)均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。
　　6.隨著纖維化分期的增加，HAI逐漸升高(P＞0.05）。肝組織Th17細(xì)胞在S1期(19.18±10.597)/HPF低于S2與S3期，而在S2與S3期無(wú)明顯差異(28.00±14.830/HPF vs26.78±15.903/HPF)。基線HCV RNA載

8、量、血清ALT水平、外周血T細(xì)胞亞群、肝組織Treg細(xì)胞在不同肝組織纖維化分期中，均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。
　　7.基線HCV RNA、ALT、HAI、T細(xì)胞頻率，在脂肪變組與無(wú)脂肪變組差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　8.IL28B rs12979860CC型與CT型相比，血清ALT水平、體重指數(shù)(body mass index，BMI)、胰島素抵抗指數(shù)(Homeostatic model assessme

9、nt of insulin resistance，HOMA-IR)、外周血CD3+T、CD4+T、CD8+T細(xì)胞頻率、CD4+/CD8+比值、CD4+CD25Foxp3+Treg細(xì)胞頻率，HAI、炎癥壞死分級(jí)、纖維化分期、HCV RNA病毒載量、肝組織Treg細(xì)胞及Th17細(xì)胞，均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P＞0.05。
　　9.基線HCV RNA載量、HOMA-IR、HAI是慢性HCV感染者SOC治療達(dá)到RVR的獨(dú)立影響因素;血清ALT水平

10、、外周血T細(xì)胞亞群的頻率、肝組織Treg、Th17細(xì)胞及Treg/Th17比值在RVR組與NRVR組間，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論:
　　浸潤(rùn)肝組織的Treg及Th17細(xì)胞與慢性HCV感染者肝組織的炎癥有關(guān)，Th17細(xì)胞與較重的肝組織纖維化有關(guān)。基線HCV RNA載量、HOMA-IR、HAI是快速病毒學(xué)應(yīng)答的獨(dú)立影響因素。IL28B rs12979860基因型與血清ALT水平、HCV RNA載量、肝組織炎癥壞死、纖維化程度