高通量測(cè)序技術(shù)在稽留流產(chǎn)遺傳學(xué)分析中的應(yīng)用.pdf

1、目的：通過(guò)高通量測(cè)序技術(shù)對(duì)稽留流產(chǎn)絨毛的染色體進(jìn)行檢測(cè)，通過(guò)分析染色體數(shù)目變異和染色體片段拷貝數(shù)變異，研究胚胎染色體異常與稽留流產(chǎn)之間的關(guān)系，探討高通量測(cè)序技術(shù)在稽留流產(chǎn)遺傳檢測(cè)中的應(yīng)用。通過(guò)對(duì)稽留流產(chǎn)的夫妻雙方進(jìn)行遺傳檢測(cè)，判斷胚胎染色體異常的來(lái)源和遺傳方式，為再次妊娠提供可靠的實(shí)驗(yàn)室依據(jù)和遺傳咨詢指導(dǎo)。
　　方法：對(duì)6例稽留流產(chǎn)患者行清宮術(shù)，收集絨毛組織，同時(shí)采集稽留流產(chǎn)夫妻的外周血。利用核酸提取試劑盒提取基因組DNA，超聲波

2、破碎后進(jìn)行文庫(kù)制備，最后在Hiseq2000測(cè)序儀上完成高通量測(cè)序。經(jīng)生物信息學(xué)分析，統(tǒng)計(jì)染色體異常的類型，探討稽留流產(chǎn)的發(fā)生方式。通過(guò)將檢測(cè)到的拷貝數(shù)變異與國(guó)際基因組變異數(shù)據(jù)庫(kù)(Database of Genomic Variants)進(jìn)行對(duì)比，排除常見(jiàn)的多態(tài)性CNV，再與DECPHER、UCSC、OMIM數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行對(duì)比，結(jié)合已有的文獻(xiàn)報(bào)道，分析其拷貝數(shù)變異是否具有致病性。
　　結(jié)果：6例家系樣本全部檢測(cè)成功。6例稽留流產(chǎn)絨毛樣

3、本中，染色體異常標(biāo)本5例，分別為2、3、7、8、15三體型染色體，均為新發(fā)突變。同時(shí)，檢測(cè)得到CV2287家系父親、CV2293家系母親和CV2300家系父母的染色體存在微缺失/微重復(fù)，經(jīng)査閱DGV數(shù)據(jù)庫(kù)，都顯示為正常人攜帶的CNV變異。1例稽留流產(chǎn)（CV2295)，未發(fā)現(xiàn)染色體數(shù)目變化，但存在兩個(gè)微缺失，其中一個(gè)微缺失遺傳自母親，另一微缺失為正常人攜帶的CNV變異，未檢出致病原因，結(jié)果為陰性。
　　結(jié)論：染色體異常是早期稽留流產(chǎn)