H1N1小鼠模型的建立及板藍(lán)根顆粒對(duì)H1N1模型小鼠的作用的研究.pdf

1、甲型H1N1流感最初發(fā)現(xiàn)于2009年3月，在墨西哥暴發(fā)“人感染豬流感”疫情，并迅速在全球范圍內(nèi)蔓延。世界衛(wèi)生組織（WHO）初始將此型流感稱為“豬流感”，后將其更名為“甲型H1N1流感”。6月11日，WHO宣布將甲型H1N1流感大流行警告級(jí)別提升為6級(jí)，全球進(jìn)入流感大流行階段。此次流感的病原體為新型H1N1流感病毒株，病毒基因中包含有豬流感、禽流感和人流感三種流感病毒的基因片段。在藥物治療方面，達(dá)菲是世界衛(wèi)生組織指定的治療此次新型的甲型流

2、感的有效藥物，但是，在許多發(fā)達(dá)國(guó)家，許多患者已經(jīng)對(duì)抗甲流的有效藥物達(dá)菲產(chǎn)生了耐藥性，面對(duì)如此復(fù)雜的情況，需要建立H1N1病原實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型，為進(jìn)一步研究該病毒的病原特性、發(fā)病機(jī)理、藥物篩選、疫苗評(píng)價(jià)等方面的研究提供重要研究基礎(chǔ)。
　　 首先對(duì)2009年流行的A/California/7/2009和A/California/4/2009進(jìn)行了病毒感染力的比較，從體內(nèi)實(shí)驗(yàn)和體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果確定，A/California/7/2009比A/

3、California/4/2009有更高的感染復(fù)制能力，因此，我們選擇A/California/7/2009作為建立甲流感染動(dòng)物模型的病毒株。
　　 小鼠的呼吸道解剖結(jié)構(gòu)與人比較相似，易感染流感病毒。小鼠氣管和肺組織中兼有唾液酸a-2，3半乳糖苷受體和唾液酸a-2，6半乳糖苷受體，甲型H1N1流感病毒對(duì)這兩種受體都具有親和性，而且小鼠遺傳背景均一，個(gè)體差異小，試驗(yàn)結(jié)果精確可靠。因此我們選用BALB/c小鼠作為動(dòng)物模型。通過第一部

4、分的實(shí)驗(yàn)可以證實(shí)，甲型流感病毒株A/California/7/2009可以直接感染BALB/c小鼠，不需要在小鼠肺臟上多次傳代適應(yīng)。以滴鼻方式感染BALB/c小鼠，感染后第3天小鼠出現(xiàn)體重下降，豎毛，精神萎靡的現(xiàn)象，第4天開始有死亡，感染后的小鼠8天內(nèi)死亡率100％。解剖小鼠，發(fā)現(xiàn)肺組織肺間質(zhì)增寬炎細(xì)胞浸潤(rùn)，間質(zhì)血管擴(kuò)張充血；肺泡腔內(nèi)水腫液及炎細(xì)胞滲出：細(xì)支氣管粘膜脫落壞死，以重度彌漫性間質(zhì)性肺炎為主要表現(xiàn)。甲型流感病毒可以在體內(nèi)多組織

5、臟器中檢測(cè)到。感染后的小鼠在病毒學(xué)、分子生物學(xué)、病理學(xué)方面的檢測(cè)結(jié)果都證明BALB/c小鼠感染甲型H1N1病毒的動(dòng)物模型是成立的，這為研究有效的抗流感藥物以及預(yù)防甲型H1N1流感病毒疫苗建立了評(píng)價(jià)平臺(tái)。
　　 根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，許多中藥對(duì)季節(jié)性流感在抗病毒、提高免疫力、消除炎癥方面都有一定的治療作用。在以往的流感中，板藍(lán)根都有較好的預(yù)防和治療作用，但在甲型H1N1流感的治療方面的作用并不明確。本實(shí)驗(yàn)選擇了板藍(lán)根這種藥物，以甲型H1N

6、1流感病毒感染小鼠作為藥物評(píng)價(jià)模型，從抗病毒和消除炎癥兩方面來研究該藥對(duì)甲型H1N1流感病毒的作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示板藍(lán)根可明顯延長(zhǎng)甲型H1N1病毒感染小鼠的存活天數(shù)，提高存活率，與模型組比較差異顯著（P<0.05）。解剖小鼠，可見板藍(lán)根組肺臟病變范圍較模型組小，對(duì)甲型H1N1病毒感染所致肺部病變具有減輕作用，說明板藍(lán)根對(duì)甲型流感病毒感染小鼠有一定的保護(hù)作用，但是從小鼠的肺組織病毒載量來看，板藍(lán)根組與模型組的差異不顯著，這說明板藍(lán)根抗病毒的