龍膽總苷粉針劑的藥學研究.pdf

1、現代藥理研究表明,龍膽總苷(total =glucosidesfromRadixgentianae,TGG)是中藥龍膽的主要活性部位,具有保肝利膽、抗炎抗菌多方面的生理活性,對于急慢性肝病的治療具有確切的療效,但迄今尚未有龍膽總苷有效部位的制劑被批準上市。因此,本課題擬從龍膽中分離純化具保肝、護肝作用的有效部位龍膽總苷(總裂環(huán)環(huán)烯醚萜苷類化合物),進行其中間體及注射用凍干粉針劑的制備工藝、質量標準、穩(wěn)定性和藥動學的研究,為新藥的研制和申

2、報奠定基礎。
　　本研究主要包括以下六部分內容:
　　1、龍膽藥材資源調查和質量標準研究
　　(1)比較了21批不同產地和采收季節(jié)龍膽藥材的質量,確定主要產地和藥材來源。(2)通過多批藥材的研究,建立了龍膽藥材的質量標準,主要包括藥材性狀、鑒別、含量測定(有效部位TGG的含量測定及主要有效成分龍膽苦苷、獐牙菜苷、獐牙菜苦苷的含量測定)和RP-HPLC指紋圖譜。除四川成都、河南商丘等個別產地的藥材以外,其他產地龍膽藥材的

3、指紋圖譜相似度良好。指紋圖譜相似度分析結果與主要成分定量分析所歸納結果基本一致。
　　2、龍膽總苷提取純化工藝的研究
　　(1)優(yōu)化龍膽藥材提取工藝。比較了5種常見提取方式,采用加熱回流提取法。通過單因素考察及正交試驗設計,對影響龍膽提取工藝的因素進行了優(yōu)化。確定龍膽最佳提取工藝為:龍膽藥材用70％乙醇提取三次,每次1h,溶劑用量分別為10倍、8倍、8倍。(2)大孔吸附樹脂法分離純化龍膽總苷。以龍膽苦苷的吸附量、解吸率和產物

4、中龍膽苦苷的百分含量為考察指標,篩選樹脂。以產物中龍膽苦苷的轉移率和百分含量為指標,通過單因素考察結合星點設計-效應面法對最佳樹脂HPD300的純化工藝進行了優(yōu)化。10批TGG中間體指紋圖譜相似度在0.986-0.998之間,說明不同批次龍膽總苷中間體的質量具有良好的一致性,提取純化工藝穩(wěn)定。
　　3、龍膽總苷中間體的穩(wěn)定性研究
　　(1)龍膽苦苷在體外生物樣品中的穩(wěn)定性研究。進行了龍膽苦苷在不同生理pH及大鼠生物樣品中的穩(wěn)

5、定性研究,結果顯示,龍膽苦苷在胃內容物、胃黏膜、小腸內容物、腸黏膜和肝組織勻漿中的降解過程類似于其在各自不同pH緩沖液中的降解過程,提示這些部位的藥物代謝酶對龍膽苦苷沒有降解作用。(2)龍膽苦苷水溶液的降解動力學研究?？疾炝藴囟?、pH、緩沖鹽種類、離子強度、光照等對龍膽苦苷水溶液穩(wěn)定性的影響,以確定其最適保存條件。
　　4、龍膽總苷粉針劑的成型工藝及配伍穩(wěn)定性研究由于龍膽總苷性質不穩(wěn)定、在胃腸道中容易被破壞、口服生物利用度低,所以

6、將龍膽總苷有效部位制成凍干粉針劑。以外觀、色澤及復溶性為指標對龍膽總苷粉針劑的處方進行了優(yōu)化,并通過繪制凍干曲線確定了最佳冷凍干燥工藝。為方便臨床合理用藥,對注射用龍膽總苷與輸液配伍的穩(wěn)定性進行了研究。結果顯示,龍膽總苷注射液與5種常見輸液(5%葡萄糖、10%葡萄糖、5%葡萄糖氯化鈉、0.9%氯化鈉及復方氯化鈉注射液)配伍使用后,8h內各配伍液的外觀、pH、有效成分含量均無明顯變化。
　　5、龍膽總苷粉針劑質量標準和穩(wěn)定性的研究對

7、3批龍膽總苷粉針劑樣品進行了性狀、鑒別(TLC及HPLC鑒別)、檢查(裝量差異、pH、水分、可見異物、澄明度、鞣質、樹脂、草酸鹽、蛋白質、熾灼殘渣、鉀離子、重金屬、砷鹽、指紋圖譜)、含量測定(龍膽總苷及龍膽苦苷、獐牙菜苷、獐牙菜苦苷等3種裂環(huán)環(huán)烯醚萜苷)等研究,建立了龍膽總苷粉針劑的質量標準。對3批樣品進行影響因素試驗和加速穩(wěn)定性試驗,以樣品性狀、鑒別、水分、pH、含量及指紋圖譜等為指標?？疾鞓悠返姆€(wěn)定性,以確定制劑的貯存條件、包裝材料

8、及有效期。
　　6、龍膽總苷注射液的藥動學研究建立Beagle犬血漿中龍膽苦苷HPLC測定方法,研究龍膽苦苷口服及靜注給藥后在Beagle犬體內的藥代動力學及口服給藥的絕對生物利用度。
　　結果表明:龍膽苦苷靜注給藥后在Beagle犬體內的藥代動力學符合二室模型,t1/2α和t1/2β分別為(0.1212±0.0900)h和(1.11±0.12)h,Vd與CL分別為(4.06±0.92)L和(2.59±0.53)L·h-1;