一先天性無虹膜與眼球震顫家系的分子遺傳學研究.pdf

1、先天性虹膜缺損（Aniridia，簡稱無虹膜）是一種罕見的雙眼發(fā)育性疾病，累及全眼球。主要特征表現(xiàn)為眼部組織不同程度的發(fā)育異常，如先天性無虹膜、眼球震顫、弱視、先天性青光眼、白內障等。疾病的臨床表型多變，不同患者可有不同程度的眼部發(fā)育異常表現(xiàn)，在人群中發(fā)病率約為60,000～100,000分之一。
　　配對盒因子6，即PAX6基因（OMIM607108，GenBank M93650）是最初被認為與虹膜缺損有關的基因，存在于染色體1

2、1p13上，長度大約為22kb，其中包含了13個外顯子和14個內含子。PAX6基因參與調控多種組織和器官的生長發(fā)育過程，包括眼表組織、嗅球、神經管、腸道及胰腺，而該基因發(fā)生異常時，則會引起相應的臨床表現(xiàn)，例如無虹膜，角膜混濁、角膜炎、白內障、青光眼、晶體異位或缺失、睫狀體發(fā)育不全、黃斑中心凹發(fā)育不全、斜視、眼球震顫、Peter’s異常、視神經缺損等。
　　本課題中，我們對中國湖北省偏遠地區(qū)一先天性無虹膜家系開展了一系列研究工作，家

3、系中患者臨床表型有所不同，臨床初步診斷為先天性無虹膜伴眼球震顫。希望通過對該家系進行臨床及分子遺傳學分析，檢測該家系的致病基因以及突變，初步探討PAX6基因突變致先天性無虹膜及眼球震顫的分子遺傳學機制。
　　目的：通過研究我國一遺傳性先天性無虹膜與眼球震顫家系的臨床特征，研究其中的PAX6基因特征和基因突變，通過尋找致病基因及其位點，探討其分子發(fā)病機制。
　　方法：對該家系三代5名患者及3名正常成員進行病史采集、靜脈采血和眼

4、科檢查，家系成員均否認近親結婚史。詳細的眼科檢查包括視力、裂隙燈、眼底鏡、眼壓、眼底彩照等測定。提取外周血白細胞基因組DNA，應用聚合酶鏈反應（Polymerase chain reaction，PCR）擴增PAX6基因的所有外顯子進行測序并與參考數據庫比較，分析該突變是否與疾病表型共分離。通過生物信息學分析氨基酸序列變化，分析該致病突變對蛋白質的結構和功能變化的影響。
　　結果：該家系患者均表現(xiàn)為先天性無虹膜與眼球震顫，但不同患

5、者的臨床表型并非完全一致。除先證者外家系中另外二名患者還表現(xiàn)為先天性的白內障。家系中的其他成員表型正常。對家系5例患者的PAX6候選基因進行遺傳分析，結果顯示，PAX6基因的第7號外顯子c.393_396delTAGC雜合突變，造成自第132位氨基酸后發(fā)生移碼突變，使肽鏈合成自第145位提前終止。而另外3名正常成員均無此突變。該病在家系中呈現(xiàn)常染色體顯性遺傳(Autosomal dominant retinitis pigmentosa