六個(gè)先天性眼球震顫家系的分子遺傳學(xué)研究.pdf

1、目的：
　　對(duì)6個(gè)先天性眼球震顫家系，包括4個(gè)X連鎖先天性特發(fā)性眼球震顫(X-linked conngenital idiopathic nystagmus，XL-CIN)和2個(gè)伴有無(wú)虹膜的先天性感覺(jué)缺陷性眼球震顫(sensory defect nystagmus，SDN)家系進(jìn)行分子遺傳學(xué)研究，探討其致病的分子基礎(chǔ)。
　　方法：
　　1、X連鎖先天性特發(fā)性眼球震顫：收集4個(gè)XL-CIN家系的臨床資料及采集家系成員外周

2、靜脈血各5 ml，提取基因組DNA；以先證者基因組DNA為模板，PCR擴(kuò)增XL-CIN候選致病基因FRMD7的全部外顯子及其外顯子-內(nèi)含子拼接部的序列，DNA直接測(cè)序篩查突變位點(diǎn)；一旦發(fā)現(xiàn)致病性突變位點(diǎn)，則采用DNA直接測(cè)序方法在其家系成員進(jìn)行疾病與致病突變共分離分析，進(jìn)一步確認(rèn)致病性突變位點(diǎn)。
　　2、先天性感覺(jué)缺陷性眼球震顫：對(duì)2個(gè)伴有無(wú)虹膜的SDN家系成員進(jìn)行全面的眼部檢查，采集這2個(gè)家系共6例患者和5名健康成員外周靜脈血各

3、5 ml，提取基因組DNA；以先證者基因組DNA為模板，PCR擴(kuò)增候選致病基因PAX6的14個(gè)外顯子及其外顯子-內(nèi)含子拼接部的序列，DNA直接測(cè)序篩查突變位點(diǎn)；一旦發(fā)現(xiàn)可疑致病性突變位點(diǎn)，則采用DNA測(cè)序方法在其家系成員進(jìn)行疾病與致病突變共分離分析及單核苷酸多態(tài)性(SNP)排除分析，進(jìn)一步確認(rèn)致病性突變位點(diǎn)。
　　結(jié)果：
　　1、4個(gè)先天性特發(fā)性眼球震顫家系的遺傳模式符合X-連鎖顯性遺傳伴外顯不全，F(xiàn)RMD7基因突變篩查發(fā)現(xiàn)

4、其中2個(gè)家系攜帶已知致病性突變位點(diǎn)，即XL-CIN02家系患者在FRMD7基因外顯子8存在C.G886C錯(cuò)義突變(GGT>CGT)，導(dǎo)致FRMD7蛋白第296位的甘氨酸被精氨酸代替(p.G296R)；XL-CIN03家系患者在FRMD7基因外顯子10存在C.C910T無(wú)義突變(CGA>TGA)，導(dǎo)致該基因編碼蛋白在304位的精氨酸提前終止(p.R304X)，產(chǎn)生一個(gè)截短形式的變異多肽。
　　2、2個(gè)先天性感覺(jué)缺陷性眼球震顫家系皆伴

5、有先天性無(wú)虹膜，呈常染色體顯性遺傳。SDN-01家系患者還合并雙眼黃斑中心凹發(fā)育不良和早發(fā)性白內(nèi)障(presenile cataract)，PAX6基因突變篩查發(fā)現(xiàn)患者在該基因第5外顯子存在一個(gè)雜合性復(fù)制突變(C.95_105dupll)，該突變?yōu)橐粋€(gè)de novo新突變，導(dǎo)致該基因編碼蛋白在第36位甘氨酸提前終止(p.G36X)，產(chǎn)生一個(gè)截短的多肽；SDN-02家系表現(xiàn)單純性無(wú)虹膜，突變篩查發(fā)現(xiàn)患者在PAX6基因第8外顯子存在一個(gè)c.

6、C607T、雜合性無(wú)義突變，導(dǎo)致編碼蛋白在第203位精氨酸提前終止(p.R203X)，產(chǎn)生一個(gè)截短的多肽。
　　結(jié)論：
　　1、FRMD7 G296R和R304X突變分別是導(dǎo)致XL-CIN02和XL-CIN03家系患者致病的分子基礎(chǔ)。
　　2、在一個(gè)伴有雙眼先天性無(wú)虹膜、黃斑中心凹發(fā)育不良和早發(fā)性白內(nèi)障的先天性感覺(jué)缺陷性眼球震顫家系(SDN-01)中發(fā)現(xiàn)了一個(gè)de novo PAX6基因c.95_105dupll(p.