約氏瘧原蟲(chóng)兩個(gè)蟲(chóng)株的生存競(jìng)爭(zhēng)與瘧原蟲(chóng)屬基于coxⅢ基因的系統(tǒng)進(jìn)化研究.pdf

1、混合感染在瘧原蟲(chóng)感染中是一種極為普遍的現(xiàn)象，混合感染發(fā)生后，宿主。寄生蟲(chóng)系統(tǒng)會(huì)發(fā)生一系列比單獨(dú)感染時(shí)更為復(fù)雜的相互作用，可能對(duì)瘧原蟲(chóng)毒力進(jìn)化產(chǎn)生重要的影響。另一方面，可能會(huì)對(duì)宿主免疫應(yīng)答的產(chǎn)生及效應(yīng)強(qiáng)度產(chǎn)生重要的影響。由此看來(lái)，為了深入闡明瘧原蟲(chóng)感染宿主機(jī)體免疫應(yīng)答的機(jī)制，以對(duì)疫苗開(kāi)發(fā)做出更好的指導(dǎo)作用，加大開(kāi)展混合感染對(duì)于宿主免疫系統(tǒng)應(yīng)答的影響是非常必要的。 為了對(duì)同種而基因型有差異的蟲(chóng)株進(jìn)行分型與定量，我們采用了實(shí)時(shí)熒光定量

2、PCR(RTQ-PCR)的方法。本研究中找到了合適的分子標(biāo)記標(biāo)識(shí)約氏瘧原蟲(chóng)兩個(gè)蟲(chóng)株17XNL與265BY，運(yùn)用相對(duì)定量來(lái)對(duì)混合感染進(jìn)程中兩個(gè)蟲(chóng)株的比例進(jìn)行了實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明兩種毒力不同的蟲(chóng)株在宿主體內(nèi)發(fā)生競(jìng)爭(zhēng)作用時(shí)，毒力強(qiáng)的一方總是占據(jù)著主動(dòng)地位，它們總能在競(jìng)爭(zhēng)中獲勝。當(dāng)17XNL：265BY=5：5感染小鼠時(shí)，265BY在群體中在12天時(shí)已經(jīng)占據(jù)了81％的比例。 結(jié)合感染進(jìn)程中宿主存活率，原蟲(chóng)血癥水平等數(shù)據(jù)，我們能比較充

3、分地了解兩種毒力不同的蟲(chóng)株混合感染時(shí)的生存競(jìng)爭(zhēng)狀況及其宿主免疫反應(yīng)的表征。當(dāng)混合感染發(fā)生時(shí)，蟲(chóng)株群體數(shù)量的變化并不簡(jiǎn)單等同于兩種蟲(chóng)株單獨(dú)感染時(shí)數(shù)量的簡(jiǎn)單疊加，不論蟲(chóng)株毒力強(qiáng)弱抑或混合感染時(shí)蟲(chóng)株的比例不同，其中每一種蟲(chóng)株都受到了不同程度的抑制作用。以初始感染比例17XNL：265BY分別為1：9和9：1為例，前者在14天時(shí)17XNL被抑制的程度達(dá)到了98％，而后者中265BY在14天時(shí)被抑制的程度為60％。雖然目前還不清楚這種動(dòng)態(tài)變化的發(fā)

4、生與宿主免疫系統(tǒng)影響的具體關(guān)聯(lián)，但是本實(shí)驗(yàn)為下一步探尋宿主免疫應(yīng)答的細(xì)胞因子的變化，闡明保護(hù)性和病理性免疫應(yīng)答動(dòng)態(tài)平衡的調(diào)控機(jī)制奠定了一定的基礎(chǔ)。 本論文亦以廈門(mén)某醫(yī)院一位自然感染間日瘧原蟲(chóng)患者的血液樣本為研究材料，提取基因組DNA，擴(kuò)增coxIII基因序列，并以之作為分子標(biāo)記，構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)生樹(shù)，探討了coxIII是否可以作為瘧原蟲(chóng)屬不同種之間分子系統(tǒng)進(jìn)化研究的合適基因。通過(guò)本文中選取的瘧原蟲(chóng)屬13個(gè)種加上本實(shí)驗(yàn)獲得的間日瘧原蟲(chóng)種