輪狀病毒蛋白VP6表達(dá)及免疫學(xué)特性研究.pdf_第1頁(yè)
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1、輪狀病毒(rotavirusRV)屬呼腸病毒科(Reoviridae)輪狀病毒屬(Rotavirus)，是引起人類和哺乳動(dòng)物嚴(yán)重病毒性胃腸炎的重要病原體。RV結(jié)構(gòu)蛋白VP6位于病毒三層衣殼結(jié)構(gòu)的中間層，在病毒粒子的形成過(guò)程中起重要的作用。其直接與內(nèi)層和外層蛋白衣殼接觸，這樣它就在病毒的2個(gè)不同生物學(xué)功能(進(jìn)入細(xì)胞和基因組包裝)之間起到一個(gè)物理受體的作用。 本課題從臨床樣品中分離的人輪狀病毒TB-Chen株VP6基因，通過(guò)RT-P

2、CR得到擴(kuò)增產(chǎn)物。以pET作為表達(dá)載體，將VP6蛋白編碼基因序列插入到質(zhì)粒pET中成功構(gòu)建原核表達(dá)質(zhì)粒pET-VP6。實(shí)驗(yàn)表明，帶有pET-VP6質(zhì)粒的大腸桿菌BL21(DE3)可以高效表達(dá)目的蛋白VP6，重組表達(dá)產(chǎn)物VP6占菌體總蛋白的27.4％，其分子量約為44.9kDa，并且能被豚鼠抗SA11血清抗體識(shí)別(Westernblot)。這一結(jié)果為進(jìn)一步研究VP6的結(jié)構(gòu)和功能奠定了重要的物質(zhì)基礎(chǔ)。 對(duì)VP6蛋白進(jìn)一步純化和復(fù)性之

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