RNA干擾抑制HepG2-N10細(xì)胞系中乙肝病毒基因表達(dá)及復(fù)制的研究.pdf_第1頁
已閱讀1頁，還剩45頁未讀， 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內(nèi)容提供方，若內(nèi)容存在侵權(quán)，請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡(jiǎn)介

1、目的RNA干擾現(xiàn)象(RNAinterference，RNAi)指的是雙鏈RNA可引發(fā)同源mRNA降解。它已被成功應(yīng)用于下調(diào)內(nèi)源性基因表達(dá)，并應(yīng)用于抑制哺乳動(dòng)物體內(nèi)各種病原體的復(fù)制。在本研究中，我們?cè)u(píng)估了以U6啟動(dòng)子作為啟動(dòng)序列(pSilencer2．0-U6)載體介導(dǎo)的小RNA干擾片段在培養(yǎng)細(xì)胞株中抑制HBV復(fù)制的效應(yīng)。 方法將針對(duì)HBV基因組不同區(qū)域的核苷酸序列插入至pSilencer載體中，并將重組后的pSilencer質(zhì)粒

2、載體轉(zhuǎn)染入HepG2-N10細(xì)胞株中。HepG2-N10是一個(gè)可穩(wěn)定表達(dá)HBsAg及HBeAg的細(xì)胞株(其表達(dá)HBV血清型為adw2亞型)。以ELISA法檢測(cè)病毒抗原，以RT-PCR檢測(cè)病毒mRNA，并以熒光定量PCR法檢測(cè)分泌入培養(yǎng)基的cccDNA。 結(jié)果質(zhì)粒載體介導(dǎo)的RNAi能明顯抑制培養(yǎng)基中HBsAg及HBeAg的表達(dá)(P~0．05)。并且RT-PCR法檢測(cè)顯示病毒mRNA也被降解了，從而減少了蛋白表達(dá)及病毒逆轉(zhuǎn)錄復(fù)制的模

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽，若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲(chǔ)空間，僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理，對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯，并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容，請(qǐng)與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論