氨溴索對(duì)羅紅霉素在大鼠體內(nèi)外藥代動(dòng)力學(xué)的影響.pdf

1、背景：羅紅霉素(roxithromycin,RM)為臨床上常用治療由革蘭氏陽(yáng)性菌及革蘭氏陰性菌引起的感染的抗生素；氨溴索(Amb)多用于伴有痰液分泌不正常及排痰功能不良的急慢性肺部疾病,促進(jìn)痰液排出,改善肺功能；Amb能增強(qiáng)RM對(duì)肺組織的穿透性,提高后者在感染部位的濃度,兩者在臨床上經(jīng)常聯(lián)合使用治療支氣管肺部細(xì)菌性感染。RM主要經(jīng)肝臟代謝失活,有報(bào)道稱(chēng)Amb可能對(duì)肝藥酶活性產(chǎn)生影響。經(jīng)文獻(xiàn)檢索,未見(jiàn)Amb合用RM引起后者藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)改

2、變的相關(guān)報(bào)道。本課題探討Amb合用RM對(duì)后者藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)的影響,為臨床合理用藥提供依據(jù)。
　　 目的：研究Amb對(duì)RM在游離大鼠肝細(xì)胞溫孵液及大鼠體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)的影響,評(píng)價(jià)藥物間的相互作用及聯(lián)合用藥的合理性。
　　 方法：
　　 ①建立游離大鼠肝細(xì)胞的分離提取方法。通過(guò)光學(xué)顯微鏡、透射電鏡檢查、HE染色對(duì)肝細(xì)胞的產(chǎn)率、活力、細(xì)胞形態(tài)、超微結(jié)構(gòu)等指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定。
　　 ②建立游離大鼠肝細(xì)胞體外溫孵體系。

3、通過(guò)MTT方法測(cè)定不同濃度RM、Amb對(duì)游離大鼠肝細(xì)胞活力的影響。
　　 ③研究Amb對(duì)RM在游離大鼠肝細(xì)胞溫孵液中代謝的影響:對(duì)照組單獨(dú)在肝細(xì)胞溫孵液中加入4μg·ml-1RM；實(shí)驗(yàn)組Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ在肝細(xì)胞溫孵液中分別加入不同量的Amb,使Amb在各溫孵液中濃度分別為2、4、8μg·ml-1,RM在溫孵液中濃度均為4·μg·ml-1。各組均置于37℃的空氣浴振蕩器中振蕩孵育60 min,樣品處理后HPLC-UV檢測(cè)法測(cè)定未代謝RM

4、的含量,探明Amb對(duì)RM代謝的影響。
　　 ④Amb對(duì)RM藥代動(dòng)力學(xué)影響:72只SD大鼠隨機(jī)分為4組,給藥前禁食12h。對(duì)照組的大鼠單獨(dú)予RM；實(shí)驗(yàn)組Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分別預(yù)先予2.7mg·kg-1、5.4mg·kg-1、10.8mg·kg-1劑量的Amb,tidx6d,于第七天予Amb+RM。給藥后經(jīng)眼眶靜脈叢采集血樣,樣品處理后采用反相HPLC-UV檢測(cè)法測(cè)定RM的血藥濃度,根據(jù)RM在體內(nèi)經(jīng)時(shí)過(guò)程,用DAS2.1.1統(tǒng)計(jì)軟件求算該藥

5、單用及聯(lián)合用藥后的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。
　　 結(jié)果：
　　 ①建立了成熟的大鼠肝細(xì)胞分離方法和游離大鼠肝細(xì)胞溫孵體系,肝細(xì)胞產(chǎn)率為1～2×108細(xì)胞/肝,肝細(xì)胞活力和純度均在90％左右。
　　 ②RM的濃度在1～12μg·ml-1范圍內(nèi),Amb的濃度在0.5～16μg·ml-1范圍內(nèi),對(duì)游離大鼠肝細(xì)胞活力與空白對(duì)照組相比,未見(jiàn)顯著影響,肝細(xì)胞活力>80％。
　　 ③RM的HPLC-UV檢測(cè)方法為流動(dòng)相:乙腈:水(

6、含0.02mol·L-1磷酸二氫銨)=35:65,加三乙胺調(diào)pH值至7.1；流速:1ml·min-1；檢測(cè)波長(zhǎng):210nm；AUFS:0.004。
　　 ④在游離大鼠肝細(xì)胞體外溫孵液中,Amb對(duì)RM的代謝消除率的影響與對(duì)照組相比無(wú)明顯區(qū)別(P>0.05)。
　　 ⑤大鼠在體實(shí)驗(yàn)表明:采用隨機(jī)區(qū)組的方差分析進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組各組間RM的主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)Tmax、T1/2z、Cmax、Vz、CLz、AUC0～t、A