阿維拉霉素在鯉體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)和殘留研究.pdf

1、阿維拉霉素是由鏈球菌屬（Streptomyces viridochomogenes）發(fā)酵而成的寡糖類抗生素混合物，其中阿維拉霉素A、B為主要成分，對(duì)豬雞等動(dòng)物具有抗菌促生長作用。近些年來，全球水產(chǎn)品消費(fèi)不斷上升，尤其在發(fā)展中國家更為明顯，水產(chǎn)藥物開發(fā)步伐也逐漸加快，而將畜禽促生長劑移植于水產(chǎn)動(dòng)物是一種比較節(jié)約的捷徑。本課題在建立鯉血漿及組織中阿維拉霉素檢測方法的基礎(chǔ)上，開展了阿維拉霉素在鯉體的藥動(dòng)學(xué)及殘留消除研究，用以闡明阿維拉霉素在鯉

2、體內(nèi)的吸收、排泄和消除速度，確定阿維拉霉素在鯉體內(nèi)的標(biāo)示殘留物和殘留靶組織，建立鯉混飼阿維拉霉素的休藥期標(biāo)準(zhǔn)，提供其殘留監(jiān)測技術(shù)。 按照生物樣品中藥物定量分析的要求，建立了鯉血漿和組織中阿維拉霉素A的高效液相色譜測定方法，組織中阿維拉霉素的微生物自顯影測定方法，以及水體中阿維拉霉素A的。HPLC定量方法。對(duì)各種方法的最低檢測限、精密度、回收率等進(jìn)行了考察，建立組織定量的工作曲線，并用動(dòng)物試驗(yàn)確定了阿維拉霉素在鯉體的藥代動(dòng)力學(xué)特征

3、和休藥期。 鯉單次靜注阿維拉霉素4mg／kg b.w.，藥時(shí)數(shù)據(jù)符合無吸收二室開放模型。分布半衰期t<,1／2α>為0.12h，消除半衰期為t<,1／2β>為0.85h，表觀分布容積Vd為0.34 L,／kg，藥時(shí)曲線下面積AUC為4.94μg／mL·h，總體清除率CL（s）為0.81L／kg·h<'－1>。。結(jié)果表明阿維拉霉素在鯉體內(nèi)分布迅速且廣泛，消除快。鯉灌服阿維拉霉素40mg／kg b.w.，血漿中藥物量未達(dá)到可檢測水平

4、，表明該藥的絕對(duì)生物利用度低于10％。鯉按此劑量繼續(xù)進(jìn)行排泄實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，72h內(nèi)即可按原型排出給藥量的80％以上，說明阿維拉霉素在鯉體內(nèi)經(jīng)胃腸道吸收代謝少。 肌肉、皮膚和肝臟組織樣品加丙酮提取離心，正己烷脫脂，二氯甲烷萃取，固相萃取等凈化樣品，用微生物自顯影及高效液相色譜法方法檢測。結(jié)果顯示，高效液相色譜法的最低檢測限和最低定量限分別是0.01μg／mL、0.025μg／mL，微生物自顯影的最低檢測限和最低定量限分別是0.013μ

5、g、0.044μg。空白組織中阿維拉霉素在25～100μg/kg的添加濃度范圍內(nèi)，微生物自顯影法的回收率介于60.9～94.2％之間，變異系數(shù)≤12.7％，HPLC的回收率介于60.2～105.3％之間，變異系數(shù)≤15.1％，適合用于組織中阿維拉霉素殘留的監(jiān)測。微生物法及HPLC法測定阿維拉霉素標(biāo)準(zhǔn)溶液線性關(guān)系良好的濃度范圍分別是0.05～0.8μg、0.1～10μg/mL，線性回歸方程分別是y=3.97x+0.417（r=0.9998

6、）和y=22.17x－0.02（r=0.9999）。 鯉連續(xù)混飼8mg/kg阿維拉霉素12周后，采用：HPLC和微生物自顯影法同時(shí)檢測阿維拉霉素在肌肉、肝臟和皮膚組織中的殘留量。兩種方法檢測結(jié)果一致表明，停藥后5h各組織中阿維拉霉素均消除至檢測限量（0,025μg/g）以下，推斷阿維拉霉素在鯉體休藥期為零。 綜上所述，本課題建立了血漿、水體和組織中阿維拉霉素的檢測方法，初步闡明了阿維拉霉素在鯉體的藥代動(dòng)力學(xué)特征和殘留消除規(guī)