VEGF促進(jìn)上皮性卵巢癌細(xì)胞侵襲性的自分泌機(jī)制研究.pdf

1、背景與目的：血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor,、VEGF)作為腫瘤新生血管形成最重要的血管生成因子，在多種腫瘤的血管新生中起著關(guān)鍵作用。目前還發(fā)現(xiàn)VEGF通過自分泌或旁分泌方式作用于腫瘤細(xì)胞本身，增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞的侵襲能力。在乳腺癌、腦膠質(zhì)瘤等研究中發(fā)現(xiàn)VEGF因子是通過上調(diào)腫瘤細(xì)胞中趨化因子受體CXCR4的表達(dá)來增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞的侵襲性，在卵巢癌中未見相關(guān)報(bào)道。本研究一方面從體外細(xì)胞培養(yǎng)來

2、研究VEGF對卵巢癌細(xì)胞CXCR4表達(dá)的影響及由此引起的癌細(xì)胞侵襲力的變化；另一方面以上皮性卵巢癌組織為研究對象，分析VEGF與CXCR4兩者表達(dá)的相關(guān)關(guān)系及兩者與臨床病理參數(shù)間的聯(lián)系。從而初步探索VEGF促進(jìn)上皮性卵巢癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移的自分泌機(jī)制，為臨床的抗VEGF治療提供一定的理論基礎(chǔ)。 方法：(1)以卵巢癌Caov-3細(xì)胞系為研究對象，運(yùn)用RT-PCR及流式細(xì)胞術(shù)檢測VEGF因子對卵巢癌Caov-3細(xì)胞中CXCR4mRNA及

3、其蛋白質(zhì)表達(dá)水平的影響；采用Boyden侵襲小室檢測VEGF因子刺激后Caov-3細(xì)胞侵襲性的改變；用ELISA方法檢測CXCR4受體被激活后癌細(xì)胞分泌VEGF水平的變化。(2)以手術(shù)切除的上皮性卵巢癌組織為研究對象，應(yīng)用免疫組化和原位雜交技術(shù)檢測VEGF與CXCR4在卵巢癌組織中的表達(dá)情況。 結(jié)果：(1)RT-PCR產(chǎn)物凝膠電泳結(jié)果顯示，VEGF因子可顯著增加Caov-3細(xì)胞中CXCR4 mRNA的表達(dá)。流式細(xì)胞儀檢測發(fā)現(xiàn)VE

4、GF因子刺激細(xì)胞24小時(shí)后，細(xì)胞平均熒光強(qiáng)度為26.20±1.45，與對照組比較，差異具有顯著性(P

5、異(P<0.001)。ELISA結(jié)果顯示CXCR4受體被激活后，癌細(xì)胞分泌VEGF水平明顯增高，72小時(shí)作用組為對照組的4.65倍，差異具有顯著性(P<0.001)。(2)免疫組化和原位雜交檢測結(jié)果顯示卵巢癌組織中VEGF及VEGF mRNA陽性表達(dá)率分別為51.62％、54.84％，兩者的表達(dá)水平在不同組織學(xué)類型、臨床分期、分化程度以及生存狀況間的比較均無明顯差異(P>0.05)，而與轉(zhuǎn)移狀況及腹水量有關(guān)(P<0.05)；CXCR4蛋

6、白在卵巢癌組織中陽性表達(dá)率為64.52％，其表達(dá)水平在不同組織學(xué)類型、分化程度、腹水量以及患者生存狀況間的比較均無明顯差異(P>0.05)，而與臨床分期及轉(zhuǎn)移狀況有關(guān)(P<0.05)；卵巢癌組織中VEGF蛋白與CXCR4蛋白的表達(dá)呈正相關(guān)(Spearman相關(guān)系數(shù)為0.575，P=0.001)。 結(jié)論：(1)VEGF能促進(jìn)卵巢癌Caov-3細(xì)胞的侵襲性。(2)VEGF因子可通過影響卵巢癌細(xì)胞中CXCR4分子的表達(dá)，從而增強(qiáng)腫瘤細(xì)