As-,2-O-,3-對H-,22-細胞源exosome外泌的影響及其與exosome聯(lián)合應用的治療性研究.pdf

1、重慶醫(yī)科大學碩士學位論文AsO對H細胞源exosome外泌的影響及其與exosome聯(lián)合應用的治療性研究姓名：向自武申請學位級別：碩士專業(yè)：病理學與病理生理學指導教師：沈宜20090401重慶醫(yī)科大學碩士研究生學位論文泌機制奠定基礎。另外，也觀察exosome與三氧化二砷聯(lián)合應用對小鼠皮下種植性肝癌模型的治療效應。方法：1三氧化二砷對小鼠肝癌細胞(H2：)源exosome外泌的影響：用MTT法測定H22細胞生長曲線，確定三氧化二砷對H2

2、2細胞抑制率為10％的藥物濃度，并確立H22細胞源exosome提取的最佳收集細胞培養(yǎng)液時間；采用超速分級離心和蔗糖密度梯度離心法提取純化exosome；利用Bradford法定量exosome總蛋白；借助熒光探針Fura2和倒置熒光顯微鏡測Ca2系統(tǒng)檢測細胞胞內Ca2的變化；采用免疫印跡法(Westernblot)檢測SNARE復合物相關蛋白一一syntaxin。2三氧化二砷與小鼠肝癌細胞(H22)源exosome聯(lián)合應用對小鼠皮下種

3、植性H22肝癌模型的治療性研究：小鼠皮下接種H22細胞(5x105個／只)后的第2天開始腹腔注射三氧化二砷，1次／天，連續(xù)10d。第4天開始皮下注射H22源exosome，每隔4天一次，連續(xù)3次。觀察各組腫瘤生長情況。于腫瘤細胞接種后第25天記錄存活率，處死存活小鼠稱取體重并解剖腫瘤稱瘤重，計算腫瘤抑制率。免疫組織化學法檢測各組腫瘤組織中CD4、CD8十T淋巴細胞浸潤情況。結果：l三氧化二砷對小鼠肝癌細胞(H22)源exosome外泌的