花粉管通道法將外源DNA導入玉米引起變異的研究.pdf

1、本文利用花粉管通道法將外源DNA(大豆)導入玉米自交系，后代產(chǎn)生了多種多樣的變異類型，變異性狀十分豐富，這些變異性狀有的具有供體性狀，有的產(chǎn)生新的性狀，通過對其后代農(nóng)藝性狀觀察、葉綠素含量測定、過氧化物同工酶酶譜、營養(yǎng)指標測定等分析。具體結果如下： 1)提取供體(高蛋白大豆富錦J05-2-075)的總DNA，配成500μg/mI濃度，分別在受體(普通玉米自交系7313)自交授粉后22h、24h、26h導入，從變異的效果來看：26

2、h>24h>22h(D<,1>代、D<,2>代表現(xiàn)相同)，其中D<,1>代26h處理的變異率最高，1.34％；D<,2>代26h處理的變異率為1.09％。 2)調查田間農(nóng)藝性狀(如株高、穗位高、葉片數(shù)、葉片的長度與寬度、光合葉面積、雄穗分枝數(shù)、百粒重、生育期、結苞數(shù)、果穗長度和籽粒形狀等)，對不同于CK的植株的農(nóng)藝性狀進行觀察、記錄、統(tǒng)計與分析，結果表明這些變異有的表現(xiàn)為供體性狀(如生育期延長、百粒重減輕、黃色籽粒形狀橢圓似大豆

3、等，例見圖3-5中的26-D<,1>-6和圖3-9中的26-D<,2>-5)，有的表現(xiàn)為新的性狀(如植株高度和葉片長寬度有變化、植株有分蘗、雄穗分枝數(shù)和雌穗數(shù)增加、籽粒形狀不規(guī)則，粒小，有稃，百粒重明顯減少等，例見圖3-5中的26-D<,1>-11、26-D<,1>-13和圖3-9中的26-D<,2>-3、26-D<,2>-19、26-D<,2>-21等)。 3)對獲得的變異株進行過氧化物酶同工酶酶譜分析，結果表明：變異株中同工

4、酶酶譜變異大，變異后代與受體間有明顯的差異(如變異株26h-D<,2>-19在遷移率Rf<,13>=0.87、Rf<,14>=0.89，出現(xiàn)了兩條供體特有而受體沒有的酶譜帶，酶帶顏色深，活性強；26h-D<,2>-3在迂移率Rf<,10>-0.57、Rf<,12>=0.69、Rf<,14>=0.82出現(xiàn)了供體和受體都沒有的酶譜帶。 4)對D<,2>代變異株系籽粒的油分、蛋白質含量、醇溶蛋白含量和谷蛋白含量進行測定分析，按照選育高

5、蛋白玉米的方向要求：油分、蛋白質含量和谷蛋白含量有所提高，而醇溶蛋白含量降低，從中選出符合育種目標的9個株系，分別為26h-D<,2>-1、26h-D<,2>-3、26h-D<,2>-6、26h-D<,2>-7、26h-D<,2>-13、26h-D<,2>-14、26h-D<,2>-15、26h-D<,2>-18和26h-D<,2>-19，這些株系與CK相比，葉綠素含量增加，增加幅度在7.12％～28.2％；油分含量增加7.65％～44