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文檔簡介
1、本研究以甜瓜品種河套蜜瓜(Cucumis melo L.cv Hetao)為實驗材料,比較研究了花粉管通道法導入的線狀和環(huán)狀表達載體,以及攜帶和不攜帶核基質(zhì)附著區(qū)序列的表達載體對花粉管通道法轉化效率的影響;摸索花粉管通道法轉化河套蜜瓜的最佳導入時間、最佳導入濃度及適宜的柱頭切割方法。對轉基因后代進行檢測時,先應用葉片涂抹法初步篩選抗生素抗性植株,再對抗性植株進行PCR檢測。結果表明:線狀和環(huán)狀表達載體都能成功轉化得到陽性植株,轉化率沒有
2、明顯差異;目的基因表達盒兩側攜帶核基質(zhì)附著區(qū)序列,對花粉管通道法轉化河套蜜瓜沒有促進作用。摸索最佳導入時間的實驗結果顯示,在自花授粉后1～11h之內(nèi)導入外源DNA都能成功轉化得到陽性植株,授粉后5h導入外源DNA轉化率最高,授粉24h以后導入均沒有檢測到陽性植株;摸索最佳導入濃度的實驗結果表明,四種濃度導入的轉化率沒有顯著差異;探索適宜的柱頭切割方法的實驗結果顯示,切除全部柱頭導入的轉化率最高。
通過本研究,初步明確了載體
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