球囊菌(Ascosphaera apis)侵染對(duì)意大利蜜蜂免疫反應(yīng)的影響.pdf

1、白堊病是一種由專性病原真菌蜜蜂球囊菌侵染所產(chǎn)生的蜜蜂幼蟲病。球囊菌唯一的侵染途徑是以孢子形式經(jīng)口攝入并在幼蟲進(jìn)入中后腸相通的蛹期這一特殊時(shí)期進(jìn)行侵染。當(dāng)球囊菌孢子進(jìn)入蜜蜂體內(nèi)至完成侵染，以細(xì)胞免疫和酚氧化酶為代表的體液免疫在蜜蜂個(gè)體免疫中的如何變化是未知的。
　　本試驗(yàn)利用室內(nèi)人工飼養(yǎng)意大利蜜蜂幼蟲及接種球囊菌孢子技術(shù)，探究5日齡初的意大利蜜蜂被接種不同劑量球囊菌孢子（1×107、2.5×107、5×107、1×108孢子數(shù)/mL

2、）后的白堊病感染率，發(fā)現(xiàn)5×107孢子數(shù)/mL有效感染率達(dá)到90.00±2.55％。在此基礎(chǔ)上對(duì)被球囊菌侵染的蜜蜂個(gè)體免疫反應(yīng)進(jìn)行初步探究，檢測(cè)了蜜蜂血淋巴中血細(xì)胞形態(tài)、血細(xì)胞總數(shù)、黑化反應(yīng)、酚氧化酶原基因的轉(zhuǎn)錄表達(dá)相對(duì)定量分析。結(jié)果顯示：血淋巴中未出現(xiàn)明顯的細(xì)胞免疫行為；接種之后24h內(nèi)的血細(xì)胞總數(shù)在接種孢子組和空白對(duì)照組之間沒有差異；接種孢子組的血淋巴黑化反應(yīng)出現(xiàn)早并且程度深；蜜蜂體內(nèi)酚氧化酶原基因轉(zhuǎn)錄水平隨著個(gè)體發(fā)育的進(jìn)行呈上升趨

3、勢(shì)，接種孢子組蜜蜂體內(nèi)酚氧化酶原基因轉(zhuǎn)錄水平的相對(duì)表達(dá)量在72h內(nèi)高于空白對(duì)照組，第84h則出現(xiàn)降低，并且遠(yuǎn)低于空白對(duì)照組。
　　本試驗(yàn)初步探究出了球囊菌侵染對(duì)意大利蜜蜂個(gè)體免疫反應(yīng)的影響。球囊菌侵染對(duì)被接種球囊菌孢子后蜜蜂的細(xì)胞免疫沒有明顯影響；以酚氧化酶原級(jí)聯(lián)為主的體液免疫則對(duì)球囊菌的侵染產(chǎn)生應(yīng)答，酚氧化酶催化參與的黑化反應(yīng)加強(qiáng)；酚氧化酶原基因相對(duì)表達(dá)量先增加后降低的現(xiàn)象則反映了蜜蜂個(gè)體免疫與病原侵染間的抗?fàn)?。本試?yàn)為蜜蜂白堊