中藥復方清肝排毒飲抗乙肝病毒和實驗性肝損傷的藥效學研究.pdf

1、研究目的:通過體內外抗乙肝病毒實驗研究，評價中藥復方清肝排毒飲抗乙肝病毒的作用效果；通過抗免疫性肝損傷和化學性肝損傷的實驗研究，評價該復方對實驗性肝損傷的保護作用效果并探討其作用機制，為清肝排毒飲應用于臨床治療慢性乙型肝炎進一步提供實驗依據。 實驗內容: 1、復方清肝排毒飲對小鼠的急性毒性試驗在小鼠急性毒性試驗研究，我們通過記錄動物中毒表現及死亡情況，測定不同濃度的清肝排毒飲對小鼠的毒副作用，從而確定試驗的劑量范圍。結果

2、顯示，復方清肝排毒飲80g/kg/d劑量可能對小鼠影響較大，而40g/kg/d劑量下對小鼠可能影響較小，故本課題以下實驗所用劑量均在40g/kg/d劑量范圍以下進行。 2、復方清肝排毒飲體內外抗乙肝病毒實驗研究 在體內抗DHBV的實驗研究中，選擇由先天感染性鴨乙肝病毒為模型。分別于T<,0>、T<,5>、T<,10>、P<,3>各時間點采血，分離血清，用斑點雜交法測定血清中DHBV的載量變化。結果顯示，清肝排毒飲大、中劑

3、量組均有不同程度抑制DHBV DNA作用，與拉米夫定組相比較無顯著差異性，停藥后反跳不明顯。 在體外抗HBV的實驗研究中，采用2.2.15細胞模型，以HBsAg、HBeAg作為藥物效果檢測指標，并用MTT法檢測藥物細胞毒性。結果顯示，清肝排毒飲對2.2.15細胞的半數毒性濃度(TC<,50>為>40.23mg/mL。復方清肝排毒飲對HBsAg，HBeAg的半數抑制濃度(IC<,50>)分別為<27.75mg/mL和54.42mg

4、/mL；治療指數(TI)分別為>1.45和>0.74，顯示清肝排毒飲在體外無顯著的直接抑制乙肝病毒復制的作用。 3、復方清肝排毒飲體內抗免疫性肝損傷和化學性肝損傷的實驗研究 體內抗免疫性肝損傷作用研究采用刀豆蛋白A(Con A)所誘導的小鼠急性肝損傷模型，用清肝排毒飲大、小劑量組(40g/kg，20g/kg)進行治療，并與聯苯雙酯治療組為對照，檢測小鼠血清丙氨酸轉氨酶(ALT)、腫瘤壞死因子(TNF-α)和γ-干擾素(I

5、FN-γ)含量，觀察肝組織病理改變。清肝排毒飲大劑量組小鼠ALT活性、IFN-γ和TNF-α含量均明顯低于模型組，差異有顯著性意義(P<0.05)，但與聯苯雙酯組比較，差異無顯著性意義(P>0.05)；清肝排毒飲大劑量組肝臟病理改變明顯減輕。表明清肝排毒飲對Con A所致小鼠肝損傷具有較好的保護作用，抑制T淋巴細胞活化和IFN-γ、TNF-α的釋放是其主要的作用機制。 體內抗化學肝損傷作用研究采用醋氨酚所導致的小鼠肝損傷模型，用

6、清肝排毒飲大、中、小劑量組(80g/Kg， 40g/kg，20g/kg)進行治療，并與聯苯雙酯治療組對照，檢測小鼠血清丙氨酸轉氨酶(ALT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)水平，觀察肝組織病理改變。清肝排毒飲大、中劑量組能顯著抑制小鼠血清ALT，升高SOD、GSH水平，與模型組比較，差異有顯著性意義(P<0.05)，但與聯苯雙酯組比較，差異無顯著性意義(P>0.05)；清肝排毒飲大、中劑量組肝臟病理改變明顯減輕。表明清肝排