脂肪組織差異表達(dá)基因RETN、CAV1、PLA2G16與阿勒泰羊尾脂沉積代謝關(guān)系的研究.pdf

1、阿勒泰羊是一種脂臀型綿羊品種，主要通過尾部脂肪沉積與代謝消長規(guī)律適應(yīng)惡劣的環(huán)境以達(dá)到維持機(jī)體正常的新陳代謝和體溫，是研究綿羊尾脂沉積與代謝機(jī)制的理想模型。抵抗素（RETN）、小凹蛋白1（CAV1）、脂肪特異性磷脂酶 A2（PLA2G16）是脂肪細(xì)胞的關(guān)鍵調(diào)控因子，在細(xì)胞分化、增值等方面發(fā)揮了重要的作用。近年來研究發(fā)現(xiàn) RETN、CAV1、PLA2G16均參與脂肪的代謝、分化過程，為了進(jìn)一步證實(shí)上述三個(gè)因子對(duì)綿羊的尾脂沉積與代謝性狀的影響

2、。本論文在模擬阿勒泰羊夏秋季節(jié)脂肪沉積、春冬季節(jié)水草匱乏時(shí)尾脂代謝方式基礎(chǔ)上，利用 PCR技術(shù)克隆了綿羊 RETN、CAV1、PLA2G16基因，并對(duì)其序列進(jìn)行生物信息學(xué)分析；采用半定量 RT-PCR方法檢測了 RETN、CAV1、PLA2G16基因在綿羊主要組織中的表達(dá)；同時(shí)利用實(shí)時(shí)熒光定量 PCR技術(shù)檢測了持續(xù)饑餓與充足采食狀態(tài)下阿勒泰羊尾脂 RETN、CAV1、PLA2G16基因的差異表達(dá)情況。主要結(jié)果如下：
　　1.以阿勒

3、泰羊?yàn)檠芯繉?duì)象，通過模擬其在夏秋季節(jié)脂肪沉積、春冬季節(jié)水草匱乏時(shí)尾脂的代謝方式，構(gòu)建了饑餓與非饑餓實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀?br>　　2.以阿勒泰羊尾脂組織 cDNA為模板，通過 RT-PCR獲得 RETN、CAV1、PLA2G16基因完整CDS區(qū)序列。
　　3.半定量 RT-PCR檢測結(jié)果表明，RETN、CAV1、PLA2G16基因均在阿勒泰羊脂肪組織（腸脂和尾脂組織）中呈高豐度表達(dá)。提示 RETN、CAV1、PLA2G16基因在阿勒泰羊尾脂

4、生理過程中發(fā)揮重要作用。
　　4.應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量 PCR技術(shù)檢測了持續(xù)饑餓狀態(tài)下阿勒泰羊尾脂組織 RETN、CAV1、PLA2G16基因的表達(dá)變化情況。結(jié)果表明，RETN基因在饑餓試驗(yàn)前后阿勒泰羊尾脂組織中的表達(dá)量存在明顯差異，持續(xù)饑餓（饑餓狀態(tài)）阿勒泰羊尾脂組織中 RETN的表達(dá)量極顯著高于正常采食狀態(tài)下尾脂組織的表達(dá)量；CAV1、PLA2G16基因則結(jié)果相反，正常采食（非饑餓狀態(tài)）阿勒泰羊尾脂組織 CAV1、PLA2G16的