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1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模阂曰虮磉_(dá)系列性分析(serial analysis of gene expression,SAGE)構(gòu)建單純性肥胖患者腹部脂肪組織基因表達(dá)譜,描述新陳代謝相關(guān)基因的表達(dá)分布。 實(shí)驗(yàn)對(duì)象及方法:臨床篩查成年單純性肥胖男性患者,并取其腹部皮下脂肪組織。從脂肪組織中提取mRNA,用SAGE方法分析表達(dá)的基因種類(lèi),并確定其表達(dá)豐度。基因表達(dá)系列性分析(SAGE)技術(shù)把來(lái)自轉(zhuǎn)錄物內(nèi)特定位置的一個(gè)短的寡核苷酸序列(含有足夠的鑒
2、定一個(gè)轉(zhuǎn)錄物特異性的信息)作為區(qū)別轉(zhuǎn)錄物的標(biāo)簽(tag),這個(gè)標(biāo)簽相對(duì)應(yīng)只有一個(gè)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物;再把這些標(biāo)簽串聯(lián)在一起,形成大量多聯(lián)體,對(duì)每個(gè)克隆到載體的多聯(lián)體進(jìn)行測(cè)序并應(yīng)用SAGE軟件進(jìn)行分析,最終確定表達(dá)的基因種類(lèi),并根據(jù)標(biāo)簽出現(xiàn)的頻率確定基因的表達(dá)豐度。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果:實(shí)驗(yàn)最后總共分離出的標(biāo)簽數(shù)有67562個(gè)。與新陳代謝相關(guān)的標(biāo)簽數(shù)有1893個(gè),代表了140個(gè)基因,38個(gè)基因?yàn)楣δ芤汛_定的代謝相關(guān)基因。其中能量代謝相關(guān)基因有2個(gè),占
3、代謝基因總數(shù)的5.26%,脂代謝相關(guān)基因有6個(gè),占代謝基因總數(shù)的15.8%,糖代謝相關(guān)基因有1個(gè),占代謝基因總數(shù)的2.63%,氨基酸代謝相關(guān)基因有13個(gè),占代謝基因總數(shù)的34.2%,核苷酸代謝相關(guān)基因有16個(gè),占代謝基因總數(shù)的42.1%。38個(gè)基因中,表達(dá)豐度最高的是氨基酸代謝相關(guān)基因SCAP2,標(biāo)簽數(shù)為327,占總標(biāo)簽數(shù)的0.48%。此外,還發(fā)現(xiàn)了11個(gè)新的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物,但其相關(guān)功能不明。 結(jié)論:本研究發(fā)現(xiàn)單純性肥胖患者皮下脂肪組
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