馴鹿狂蠅COI基因分析及馴鹿狂蠅蛆病對(duì)宿主機(jī)體的影響.pdf

1、馴鹿狂蠅蛆(Cephenemyia trompe)是馴鹿的一個(gè)主要寄生蟲病病原，感染馴鹿狂蠅蛆病的馴鹿往往消瘦，抗病性差，加上自然環(huán)境等因素造成該病呈發(fā)展蔓延趨勢(shì)，每年給我國(guó)的馴鹿養(yǎng)殖業(yè)帶來了很大的經(jīng)濟(jì)損失。目前馴鹿狂蠅蛆病的研究已經(jīng)取得了很大的進(jìn)步，但是對(duì)其種屬鑒定、病理變化、免疫機(jī)能、內(nèi)分泌變化、應(yīng)激能力等還處于空白。所以本次實(shí)驗(yàn)針對(duì)馴鹿狂蠅同源性、感染后機(jī)體的變化等多方面進(jìn)行研究，為進(jìn)一步研究和有效消滅馴鹿狂蠅蛆病奠定基礎(chǔ)。

2、 本實(shí)驗(yàn)針對(duì)馴鹿狂蠅病原、30頭馴鹿狂蠅蛆自然感染馴鹿和30頭健康馴鹿進(jìn)行研究。利用分子生物學(xué)手段對(duì)馴鹿狂蠅線粒體細(xì)胞色素氧化酶COI基因進(jìn)行深入分析，進(jìn)行同源性比較，并繪出NJ進(jìn)化樹；對(duì)馴鹿狂蠅蛆感染馴鹿進(jìn)行了病理剖解，進(jìn)行了病理組織學(xué)觀察和超微病理學(xué)觀察；利用ELISA方法對(duì)機(jī)體補(bǔ)體系統(tǒng)(C3、C4)進(jìn)行研究；利用ELISA方法對(duì)機(jī)體總IgG和特異性lgG進(jìn)行研究；利用ELISA方法和放射性免疫方法對(duì)細(xì)胞因子IL-12、IFN-Y

3、和TNF-α進(jìn)行研究；利用流式細(xì)胞儀Annexin V-FITC和PI雙染色發(fā)對(duì)淋巴細(xì)胞調(diào)亡進(jìn)行研究；利用放射性免疫法對(duì)皮質(zhì)醇、T3、T4和TSH進(jìn)行研究；利用分光光度法對(duì)NO、SOD、MDA、GSH-Px和T-AOC氧化應(yīng)激進(jìn)行研究。 結(jié)果顯示:馴鹿狂蠅成蟲和Ⅲ齡幼蟲相似性為97％，馴鹿狂蠅和鹿咽狂蠅、駝鹿狂蠅、羊狂蠅、馬鼻狂蠅之間相似性為88％；病理組織學(xué)和超微病理學(xué)觀察到鼻粘膜有大量上皮細(xì)胞和淋巴細(xì)胞脫落，炎癥明顯；馴鹿狂

4、蠅蛆感染馴鹿與健康馴鹿之間的總IgG抗體差異顯著(P<0.01)，感染組產(chǎn)生了一定的針對(duì)幼蟲的特異性IgG抗體(OD=0.464±0.128)；馴鹿狂蠅蛆感染馴鹿體內(nèi)C3、C4均顯著升高(P<0.01):馴鹿狂蠅蛆感染馴鹿體內(nèi)的IL-12、IFN-Y和TNF-α顯著低予健康馴鹿(P<0.01)；馴鹿狂蠅蛆感染馴鹿外周血淋巴細(xì)胞調(diào)亡率顯著高于健康馴鹿(P<0.01);馴鹿狂蠅蛆感染馴鹿血清T3、T4顯著低于健康馴鹿(P<0.01)，馴鹿狂

5、蠅蛆感染馴鹿血清TSH顯著高于健康馴屁(P<0.01)，馴鹿狂蠅蛆感染馴鹿血清皮質(zhì)醇含量顯著高于健康馴鹿(P<0.01)；馴鹿狂蠅蛆感染馴鹿血清的NO、SOD、GSH-Px和r-AOC。均顯著低于健康馴鹿(P<0.01)，馴鹿狂蠅蛆感染馴鹿血清的MDA顯著高于健康馴鹿(P<0.01)。 實(shí)驗(yàn)證明了馴鹿狂蠅與其它種屬的狂蠅有著不同種屬特異性，馴鹿狂蠅蛆對(duì)馴鹿機(jī)體造成了炎癥加劇，免疫力降低，機(jī)體的代謝水平下降，抗應(yīng)激能力下降。進(jìn)一步