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文檔簡介
1、目的:克隆家族性急性髓系白血病相關新基因eDNA全長,在分子水平上探討急性白血病發(fā)生發(fā)展的機制。 方法:應用抑制性消減性雜交(suppressiOn subtractivehybridization,SSH)構建家族性急性髓系白血病eDNA抑制性消減文庫,獲得28個基因克隆,測序后經GenBank同源對比分析,發(fā)現11條為未知基因的EST片斷,以其中的一條未知新EST zywB-87(GenBank注冊號:CV973101)為基
2、礎:1、應用一步法逆轉錄PCR(0neStep RT-PCR)驗證其差異表達;2、應用SMART-eDNA末端快速擴增法(SMART-rapid amplification of eDNA ends,SMART-RACE)克隆家族性急性髓系白血病相關新基因的全長eDNA;3、應用生物信息學方法對家族性急性髓系白血病相關新基因的功能進行初步分析。 結果:獲得了家族性急性髓系白血病相關新基因全長eDNA,該基因定位于染色體1q31.
3、3,eDNA全長2313bp,開放讀碼框(open:reading frarne,ORF)為249bp,編碼82個氨基酸的蛋白質,Blast檢索為功能未知的新基因,已被GenBank收錄,并被命名為FAMLF,核酸注冊號為EF413001,蛋白質注冊號為ABN58747。 結論: 1、成功獲得家族性急性髓系白血病相關新基因FAMLF的eDNA全長,染色體定位于1q31.3,編碼82個氨基酸的蛋白質。 2、FAML
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