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文檔簡介
1、本文檢測了HCC中MAGE-A1、-A3的表達情況；克隆肝癌組織MAGE-A3；對克隆的HCCMAGE-A3進行蛋白表達，制造抗體。觀察MAGE-A3蛋白致敏樹突狀細胞(DC)活化的淋巴細胞對HCC細胞的體外殺傷作用，確定MAGE-A3蛋白負載DC作為HCC疫苗的可能性。通過WesternBlot，用純化的融合蛋白GST-MAGE-A3檢測上述抗體，結(jié)果顯示對應融合蛋白GST-MAGE-A3分子量59KD處有一條帶，表明所純化的IgG抗
2、體有很高的特異性。 本文將致敏DC與淋巴細胞混合培養(yǎng)，檢測最佳培養(yǎng)條件。以淋巴細胞為效應細胞，以肝癌細胞H4M、正常肝細胞為靶細胞，以多種效靶比放入96孔板中。用MTT實驗測定效應細胞對腫瘤細胞的殺傷作用。結(jié)果負載GST-MAGE-A3抗原的DC激活的CTL對肝癌細胞有明顯的殺傷作用，顯著高于正常肝細胞對照組。說明從人外周血中誘導的DC負載GST-MAGE-A3抗原后，激活的CTL在體外對肝癌細胞能產(chǎn)生高效的殺傷作用，為臨床應用
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