生物活性玻璃離子液對成骨細胞增殖的實驗研究.pdf

1、目的通過在培養(yǎng)液內(nèi)加入生物活性玻璃離子液，觀察成骨細胞培養(yǎng)過程中成骨細胞的形態(tài)學特征的變化，以了解生物活性玻璃對成骨細胞生長的影響。方法將生物玻璃晶體溶于DMEM培養(yǎng)液內(nèi)，37'C水浴24小時過濾除去晶體，測定其內(nèi)的Na、Ca、P、Si四種離子的濃度變化。以DMEM完全培養(yǎng)液作為對照組培養(yǎng)液，以加入生物活性玻璃離子液的DMEM完全培養(yǎng)液作為實驗組培養(yǎng)液。取人松質(zhì)骨源性成骨細胞和乳鼠顱骨源性成骨細胞，分別用完全DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng)，觀察成骨

2、細胞生長形態(tài)。取第二代成骨細胞以對照組和實驗組培養(yǎng)液分別培養(yǎng)，觀察成骨細胞生長過程中大體形態(tài)差異、細胞超微結(jié)構(gòu)(粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、核糖體、線粒體)的差異、細胞生長曲線(MTT比色法)的差異。結(jié)果Si離子的濃度在實驗培養(yǎng)液內(nèi)是對照培養(yǎng)液的2612％(p<0．01)，Ca是88．03％(p<0．01)，P是73．23％(p<0．01)，Na的濃度沒有差異(1~0．05)。對照組與實驗組的大體細胞形態(tài)學比較：在培養(yǎng)48小時后可見到實驗組人成骨細胞整

3、體體積較大；實驗組成骨細胞超微結(jié)構(gòu)內(nèi)比對照組有較多的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和線粒體和核糖體；細胞生長指數(shù)在培養(yǎng)第2天時即出現(xiàn)明顯的差異(p<0．01)，實驗組成骨細胞比對照組的生長曲線陡峭。結(jié)論生物活性玻璃離子液有促進成骨細胞增殖的形態(tài)學特征。 目的通過在培養(yǎng)液內(nèi)加入生物活性玻璃離子液，觀察成骨細胞生長周期的變化。方法以DMEM完全培養(yǎng)液作為對照組培養(yǎng)液，以加入生物活性玻璃離子液的DMEM完全培養(yǎng)液作為實驗組培養(yǎng)液，取第二代人松質(zhì)骨源性成骨

4、細胞用DMEM完全培養(yǎng)液培養(yǎng)6天，測定成骨細胞生長周期；成骨細胞分別用兩種培養(yǎng)液培養(yǎng)1-6天，流式細胞儀測定每天成骨細胞Gl、S、G2期的百分比：對細胞增殖活性指標SPF(S期細胞比率)和H(增殖指數(shù))進行比較。結(jié)果人成骨細胞生長周期約4天，細胞周期的百分比變化情況在1-4天內(nèi)進行對比有意義，實驗組在培養(yǎng)48小時時細胞的SPF比對照組增加(p

5、生物活性玻璃離子液能改變?nèi)顺晒羌毎纳L周期，推測生物活性玻璃對人成骨細胞的周期影響是通過數(shù)種基因的激活，調(diào)控成骨細胞的G。期縮短，細胞生長增快，通過S期快速進入了G2M期，細胞分裂提前，細胞周期縮短，結(jié)果加速細胞增殖，促進臨床骨修復(fù)。 目的通過成骨細胞的培養(yǎng)，觀察生物活性玻璃離子液對成骨細胞分泌的細胞因子的影響，以進一步探討生物活性玻璃促進成骨細胞增殖的可能機制。方法以DMEM完全培養(yǎng)液作為對照組培養(yǎng)液，以加入生物活性玻璃離子

6、液的DMEM完全培養(yǎng)液作為實驗組培養(yǎng)液，取第二代人松質(zhì)骨源性成骨細胞和乳鼠顱骨源性成骨細胞，以對照組和實驗組培養(yǎng)液分別培養(yǎng)4天，收集培養(yǎng)的成骨細胞抽提RNA，將RNA逆轉(zhuǎn)錄成cDNA，用聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR)體外擴增DNA，熒光定量檢測人成骨細胞表達的細胞因子：I型膠原(collagen-I)、骨鈣素(bonegla-protein，BGP)、成骨細胞特異轉(zhuǎn)錄因子(core-bindingfactoralpha-1，CBFAI)、類胰

7、島素樣生長因子II(IGF-2)，鼠成骨細胞2種生長因子BGP、collagen．I。結(jié)果人成骨細胞4種生長因子的表達量實驗組與對照組之比為：Collagen-I=1．773、BGP=1．848、CBFAI=2．233、IGF-2=2．106，鼠成骨細胞2種生長因子的表達量實驗組與對照組之比為：Collagen-I=3．947、BGP=2．687。實驗組與對照組相對量比較有顯著差異(p<0．05)。結(jié)論生物活性玻璃促進成骨細胞分泌Col

8、lagen．I、BGP，有利于骨基質(zhì)的重建和鈣化：生物活性玻璃促進成骨細胞分泌CBFAI、IGF-2，促進成骨細胞自身的增殖，有利于臨床骨折或骨缺損的修復(fù)。 目的：傳統(tǒng)的自體骨、異種骨、人源凍干骨、同種異體骨、凍干小牛骨等移植物都存在一定的缺點和普遍應(yīng)用的限制，因而尋求人造骨移植替代材料成為研究目標。生物活性玻璃是在此研究下的產(chǎn)物之一，深入了解國內(nèi)外研究生物活性玻璃的研究進展，以達到對此材料的完整認識。 資料來源：應(yīng)用計

9、算機檢索OvidOnline系列醫(yī)學資源(包括OvidCollection、BP、LWW期刊、Medline、BMA)1996-01／2005-08和ElsevierSDOS電子期刊2001-01／2005-01期間的相關(guān)文章，檢索詞為"boneimplant,bioglass,osteoblast,bonerestore",并限定文章語言種類為English。同時計算機檢索萬方數(shù)據(jù)庫2000-01／2005-01期間的相關(guān)文章，檢索詞

10、“生物活性玻璃成骨細胞骨移植骨修復(fù)”，并限定文章語言種類為中文。資料選擇：對資料進行初選，并查看每篇文獻后的引文。納入標準：文章所述內(nèi)容應(yīng)與生物活性玻璃的研究相關(guān)。排除標準：重復(fù)或Mata分析類文獻。資料提煉：共收集到76篇相關(guān)文獻，40篇文獻符合納入標準，排除的36篇文章為容易陳舊或重復(fù)。 資料綜合：從生物活性玻璃在組織．材料界面反應(yīng)、對成骨細胞生長周期的影響、激活基因等促進骨修復(fù)方面進行綜述，對其成份的變化對活性作用影響、應(yīng)