三種中藥配方對成骨細胞增殖和分化影響的實驗研究.pdf

1、骨質(zhì)疏松癥(簡稱OP)是以骨量減少,骨組織微細結(jié)構(gòu)破壞導(dǎo)致骨脆性增加和骨折危險性增加為特征的一種系統(tǒng)性、全身性骨骼疾病。目前,骨質(zhì)疏松癥的發(fā)病率已在世界常見多發(fā)病中躍居第7位,骨質(zhì)疏松癥已是影響健康的重要問題。隨著國內(nèi)外對骨質(zhì)疏松癥實驗研究的不斷深入,中藥在防治骨質(zhì)疏松癥中以其整體調(diào)治、療效好、無毒副作用等優(yōu)勢,引起了廣泛的關(guān)注。 骨質(zhì)疏松癥是由骨代謝的缺陷導(dǎo)致。成骨細胞在骨代謝中起著重要的作用。用體外成骨細胞培養(yǎng)可觀察到藥物對

2、成骨細胞的直接作用,方法簡便易行,結(jié)果可靠,可作為篩選抗骨質(zhì)疏松藥物的方法。 本文研究骨碎補總黃酮、(骨碎補+淫羊藿)總黃酮、[(骨碎補+淫羊藿)總黃酮+黃芪水提物]對成骨細胞增殖及分化的影響。采用胰酶-膠原酶消化法從新生大鼠顱骨獲取成骨細胞,進行原代、傳代培養(yǎng),取經(jīng)過鑒定后第三代細胞作為實驗?zāi)Ｐ?。將不同濃度的含藥培養(yǎng)基及純培養(yǎng)基與第三代成骨細胞共培養(yǎng),分別用MTT法觀察藥物對成骨細胞增殖的影響(用波長492nm處的OD值表示)

3、和氨基安替吡啉法觀察藥物對成骨細胞分化能力的影響(用堿性磷酸酶活性表示)。 實驗結(jié)果顯示,采用胰酶-膠原酶消化法,進行體外細胞培養(yǎng),可獲得比較純化的成骨細胞。加藥培養(yǎng)24h、48h、72h后測定細胞增殖結(jié)果顯示：骨碎補總黃酮、(骨碎補+淫羊藿)總黃酮100μg/mL、50μg/mL在與成骨細胞作用24h,48h,72h后能顯著促進其增殖；[(骨碎補+淫羊藿)總黃酮+黃芪水提物]100μg/mL在與成骨細胞作用24h,48h,72

4、h后能顯著促進其增殖。加藥培養(yǎng)72h后測定成骨細胞堿性磷酸酶活性結(jié)果顯示：骨碎補總黃酮200μg/mL、100μg/mL、50μg/mL印制成骨細胞堿性磷酸酶的分泌,12.5μg/mL、6.25μg/mL的則促進其堿性磷酸酶的分泌。(骨碎補+淫羊藿)總黃酮200μg/mL、100μg/mL、50μg/mL抑制其堿性磷酸酶的分泌,6.2μg/mL則促進其堿性磷酸酶分泌。[(骨碎補+淫羊藿)總黃酮+黃芪水提物]200μg/mL、100μg/