外周血Dickkopf 1和β-catenin水平在類風濕關(guān)節(jié)炎疾病活動性和骨與關(guān)節(jié)損傷中的臨床意義.pdf

1、研究背景
　　類風濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis,RA)是一種自身免疫性疾病,主要的病理改變是滑膜炎,滑膜的異常增生造成軟骨損傷以及骨與關(guān)節(jié)的破壞,最終導(dǎo)致關(guān)節(jié)畸形和功能喪失。人體的骨代謝是一個動態(tài)的平衡過程,主要包含成骨和破骨,當這個平衡被打破時就會導(dǎo)致骨密度(bone mineral density,BMD)降低和骨結(jié)構(gòu)的異常,從而表現(xiàn)為骨質(zhì)破壞和骨質(zhì)疏松(osteoporosis,OP)等。RA患者骨與關(guān)

2、節(jié)損傷的主要表現(xiàn)形式為局部的骨侵蝕和全身 OP,而這與成骨和破骨細胞有著密切的關(guān)系。Wnt信號通路在骨代謝中起著關(guān)鍵性作用,通過調(diào)節(jié)成骨細胞和破骨細胞增殖和分化從而促進骨形成。其中Dickkopf1(DKK1)和β-連環(huán)蛋白(β-catenin)是Wnt信號通路的重要成員之一,β-catenin調(diào)控骨形成和骨吸收,DKK1作為Wnt信號通路的抑制分子可以抑制成骨細胞的形成。RA患者的骨與關(guān)節(jié)損傷的機制與破骨和成骨過程密切相關(guān),但具體的機

3、制仍不清楚,有關(guān)Wnt信號通路在RA中的研究文獻不多。深入探討Wnt信號通路在RA骨與關(guān)節(jié)損傷的發(fā)病機制中的作用,為臨床上治療RA提供新的思路。
　　目的：
　　探討RA患者外周血DKK1和β-catenin水平的變化及其與RA疾病活動性、骨與關(guān)節(jié)損傷之間的相關(guān)性。
　　方法：
　　詳細記錄RA患者各臨床及實驗室指標,452例RA患者和158例健康對照組的股骨(股骨頸、Ward區(qū)、大轉(zhuǎn)子、總股骨區(qū))和腰椎(lum

4、bar spine,L2、L3、L4、L2-4)部位BMD使用雙能X線骨密度儀(lunar Prodigy DF+310504,GE Healthcare,USA)測定,所有RA患者攝雙手X線并進行Sharp評分。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)檢測其中275例RA患者和121例正常人外周血DKK1和β-catenin水平。
　　結(jié)果：
　　1.RA組血清

5、 DKK1水平[9.55(10.17) vs6.13(6.64) ug/ml,z=4.182,P<0.0001],DKK1/β-catenin比值[0.14(0.16) vs0.12(0.09),z=3.155,P=0.002]明顯高于對照組(P<0.0001)。但兩組間β-catenin水平無統(tǒng)計學差異(P=0.845)。
　　2.RA組在股骨頸區(qū)、Ward區(qū)、大轉(zhuǎn)子區(qū)、總股骨區(qū)、L2、L3、L4和L2-4的BMD均低于對照組(

6、P<0.0001)。骨量正常,骨量減少,OP的發(fā)生率在RA組分別為21.5％(97/452),40.3%(182/452),38.3%(173/452),對照組分別為50.0%(79/158),36.1%(57/158),13.9%(22/158)(χ2=55.291,P<0.0001)。
　　3.血清 DKK1、β-catenin水平和DDK1/β-catenin比值在骨量正常、骨量減少和OP組間的非參數(shù)檢驗結(jié)果顯示:DKK1在

7、三組間有統(tǒng)計學差異(P=0.010),且OP組DKK1水平[10.98(15.70)ug/ml]高于骨量正常組[8.71(10.73) ug/ml]和骨量減少組[8.00(8.77)ug/ml](χ2=9.140,P=0.010),而β-catenin水平和DDK1/β-catenin比值在三組間的差別無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
　　4.RA患者服用糖皮質(zhì)激素(glucocorticoid,GC)組中 DKK1水平[10.92

8、(15.03) vs6.86(10.05)ug/ml,z=2.731,P=0.006]、DKK1/β-catenin比值[0.17(0.23) vs0.14(0.11),z=2.047,P=0.041]、病程[8.00(9.00) vs3.00(7.25)年,z=7.821,P<0.0001]、關(guān)節(jié)腫脹數(shù)(8.57±6.39 vs7.13±5.43,t=2.946,P=0.003)、關(guān)節(jié)壓痛數(shù)(12.24±8.37 vs10.31±7.

9、22,t=3.006,P=0.003)、VAS(4.93±2.08 vs4.57±1.86cm,t=2.202,P=0.028)、HAQ[1.75(0.68) vs1.35(1.08),z=5.198,P<0.0001]、RF[144.00(120.50) vs77.50(145.50) IU/ml],z=3.355,P=0.001]、雙手X線關(guān)節(jié)間隙狹窄評分[26.00(53.00) vs5.00(22.00),z=7.115,P<0

10、.0001]、雙線X線關(guān)節(jié)骨侵蝕評分[31.00(54.00) vs4.00(26.00),z=6.622,P<0.0001]、Sharp評分[55.00(97.00) vs10.00(51.25),z=7.000,P<0.0001]、DAS28(5.92±1.52 vs5.57±1.49,t=2.049,P=0.041)、 SDAI(35.35±18.56 vs30.77±15.74,t=3.044,P=0.002)、CDAI(30.

11、61±16.77 vs26.48±14.40,t=3.073,P=0.002)均高于未服用 GC組,而β-catenin、年齡、晨僵時間等在兩組間無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。RA患者服用 GC組骨量正常、骨量減少、OP發(fā)生率分別為18.5%(48/259),37.5%(97/259),44.0%(114/259),而未服用 GC組分別為25.4%(49/193),44.0%(85/193,30.6%(59/193)(χ2=8.838,

12、P=0.012)。
　　5.DAS28緩解組、低中度活動組、重度活動組單因素方差和非參數(shù)檢驗分析顯示:RA患者在這三組間中的血清DKK1水平、關(guān)節(jié)腫脹數(shù)、關(guān)節(jié)壓痛數(shù)、晨僵時間、HAQ、RF、AKP、雙手關(guān)節(jié)間隙狹窄評分、雙膝X線關(guān)節(jié)骨侵蝕評分、Sharp評分的比較上均有統(tǒng)計學差異(P<0.0001-0.05),且DAS28重度活動組明顯高于低中度活動組。而β-catenin、DKK1/β-catenin比值等在三組間無統(tǒng)計學差異(

13、P>0.05)。
　　CDAI低中度活動組和重度活動組RA患者間的血清DKK1、β-catenin水平、晨僵時間、HAQ、RF、AKP、雙手X線關(guān)節(jié)間隙評分、雙手X線關(guān)節(jié)骨侵蝕評分、Sharp評分有統(tǒng)計學差異(P<0.0001-0.05),其中RA患者CDAI低中度活動組的血清 DKK1[5.74(8.82) vs10.64(15.24)ug/ml,z=3.704,P<0.0001]、β-catenin[54.75(64.16)

14、vs70.78(75.15)pg/ml,z=2.187,P=0.029]水平明顯低于重度活動組,而DKK1/β-catenin比值、年齡、BMI、病程、抗 CCP兩組間無明顯統(tǒng)計學差異(P>0.05)。
　　RA患者的血清DKK1水平、晨僵時間、HAQ、RF、AKP、雙手X線關(guān)節(jié)間隙狹窄評分、雙手X線關(guān)節(jié)骨侵蝕評分、雙手X線Sharp評分在SDAI低中度活動組和重度活動組有統(tǒng)計學差異,其中RA患者SDAI低中度活動組血清DKK1水

15、平明顯低于重度活動組[5.74(8.92) vs10.36(15.41)ug/ml,z=3.166,P=0.002]。而β-catenin水平、DKK1/β-catenin比值、年齡、BMI、病程、抗CCP在兩組間無統(tǒng)計學上差異(P>0.05)。
　　6.β-catenin與DKK1(r=0.335,P<0.0001)、DAS28(r=0.140,P=0.028)正相關(guān),DKK1與β-catenin(r=0.335,P<0.000

16、1)、病程(r=0.156,P=0.011)、HAQ(r=0.208,P=0.001)、關(guān)節(jié)腫脹數(shù)(r=0.234,P<0.0001)、關(guān)節(jié)壓痛數(shù)(r=0.186,P<0.0001)、AKP(r=0.144,P=0.028)、雙手X線關(guān)節(jié)間隙狹窄評分(r=0.326,P<0.0001)、骨侵蝕評分(r=0.318,P<0.0001)、Sharp評分(r=0.326,P<0.0001)、DAS28(r=0.186,P=0.04)正相關(guān)。β

17、-catenin與各個部位的BMD無相關(guān)性,但血清DKK1水平與Ward區(qū)(r=-0.122,P=0.047)、大轉(zhuǎn)子區(qū)(r=-0.226,P<0.0001)、總股骨區(qū)(r=-0.215,P<0.0001)、L2(r=-0.149,P=0.015)的BMD成負相關(guān)。
　　7.分別以雙手X線關(guān)節(jié)間隙狹窄評分、雙手X線關(guān)節(jié)骨侵蝕評分、雙手X線Sharp評分為應(yīng)變量,以年齡、病程、血清DKK1、β-catenin、抗CCP、HAQ、BM

18、I、RF、DSA28為自變量,采用Linear Regression法分析各自變量與應(yīng)變量間的多元線性相關(guān)關(guān)系,結(jié)果顯示:年齡、β-catenin、抗CCP、BMI與雙手X線關(guān)節(jié)間隙狹窄評分成負相關(guān),DKK1、病程、HAQ與雙手X線關(guān)節(jié)間隙狹窄評分成正相關(guān);BMI與雙手X線關(guān)節(jié)骨侵蝕評分成負相關(guān),DKK1、病程、HAQ與雙手X線關(guān)節(jié)骨侵蝕評分成正相關(guān);β-catenin、抗CCP、BMI與雙手X線Sharp評分成負相關(guān),DKK1、病程、

19、HAQ與雙手X線Sharp評分成正相關(guān)。
　　8.分別將RA組中股骨區(qū)、腰椎區(qū)、總體RA患者是否發(fā)生OP(0=無OP,1=OP)作為應(yīng)變量,以DKK1、β-catenin、性別、年齡、病程、是否服用GC、抗CCP、VAS、BMI、雙手X線Sharp評分為自變量,采用Logistic Regression分析(back wald法)探討RA患者發(fā)生OP的危險因素,結(jié)果顯示:
　　年齡(OR=1.036,P=0.037,95%C

20、I=1.002-1.071)、DKK1(OR=1.050,P=0.041,95%CI=1.002-1.101)、Sharp評分(OR=1.011,P<0.0001,95%CI=1.005-1.017)為 RA患者股骨區(qū) OP發(fā)生的危險因素;BMI(OR=0.775,P<0.0001,95%CI=0.673-0.891)為RA患者股骨區(qū)OP發(fā)生的保護因素。
　　年齡(OR=1.088,P<0.0001,95%CI=1.050-1.1

21、27)、Sharp評分(OR=1.007,P=0.015,95%CI=1.001-1.012)為 RA患者腰椎區(qū) OP發(fā)生的危險因素;BMI(OR=0.780,P<0.0001,95%CI=0.684-0.890)為RA患者腰椎區(qū)OP發(fā)生的保護因素。
　　年齡(OR=1.065,P<0.0001,95%CI=1.037-1.095)、Sharp評分(OR=1.010,P<0.0001,95%CI=1.004-1.015)為 RA患

22、者總體 OP發(fā)生的危險因素;BMI(OR=0.850,P=0.001,95%CI=0.772-0.937)為RA患者總體OP發(fā)生的保護因素。
　　年齡-股骨區(qū)、腰椎區(qū)、總體OP曲線下面積分別為:0.640,0.764,0.715,診斷OP的最適臨界年齡分別為53.50歲,52.50歲,52.50歲;Sharp評分-股骨區(qū)、腰椎區(qū)、總OP曲線下面積分別為:0.774,0.620,0.698,診斷OP的最適臨界Sharp評分分別為77

23、.50,78.50,57.50;DKK1-股骨區(qū)OP曲線下面積分別為:0.675,診斷OP的最適臨界DKK1為18.18ug/ml。
　　結(jié)論：
　　1.RA患者外周血DKK1水平和DKK1/β-catenin比值明顯增高,β-catenin水平無明顯變化。
　　2.外周血DKK1水平與RA患者病情活動性有關(guān),與HAQ、雙手X線關(guān)節(jié)間隙狹窄評分、雙手X線關(guān)節(jié)骨侵蝕評分、雙手X線Sharp評分成正相關(guān),而β-cateni

24、n與雙手X線間隙狹窄評分、雙手X線Sharp評分成負相關(guān),提示DKK1、β-catenin對 RA患者骨與關(guān)節(jié)的損傷影響的側(cè)重點不同。
　　3.RA患者OP發(fā)生率明顯升高,約為正常對照組的2.76倍,其各部位的BMD均有不同程度的降低。RA患者服用GC組OP發(fā)生率約為未服用GC組的1.44倍,且服用GC組DKK1水平明顯高于未服用GC組。
　　4.DKK1、Sharp評分、年齡為股骨區(qū)OP發(fā)生的危險因素,Sharp評分和年齡