葡萄籽提取物對慢性砷暴露致大鼠肝損傷的保護作用.pdf

1、背景與目的:
　　 砷是一種環(huán)境毒物和人體致癌物，在自然環(huán)境中廣泛分布。包括我國在內，全球有70個國家和地區(qū)的人們在受砷污染地下水的影響，慢性砷中毒已成為一個全球性的公共衛(wèi)生問題。砷能夠在肝臟中蓄積，砷中毒患者往往伴有一定程度的肝損傷。雖然砷與肝損傷之間的關系已經確定，但其具體機制仍不明確，目前公認的是氧化損傷學說。還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（nicotinamideadeninedinucleotidephosphate，

2、NADPH）氧化酶是一種由蛋白質亞基組成的復合物，當受到有害因子的刺激時它能產生大量的活性氧(reactiveoxygenspecies，ROS)。過量生成的ROS激活促炎性和促纖維化因子，造成包括DNA、蛋白質和脂類在內的細胞大分子的氧化損傷，出現(xiàn)肝毒性作用。因此，清除ROS，減輕氧化應激可能會減輕砷暴露引起的肝損傷。葡萄籽提取物(grapeseedextract，GSE)富含多酚類物質，在體內能夠直接清除ROS，其抗氧化能力強于維生

3、素C、維生素E以及β胡蘿卜素。本次研究的目的是觀察無急性毒性作用劑量的砷所造成的肝損傷，以及GSE對肝氧化損傷的保護作用，探討砷致肝損傷的作用機制，為治療肝損傷提供理論依據。
　　 方法:
　　 在前期建立動物模型的實驗數(shù)據和文獻報道的基礎上，進行如下分組:將40只健康雄性SD大鼠隨機分為4組，每組10只，即正常對照組，每日只飲純水;砷暴露組，每日飲含亞砷酸鈉(NaAsO2)30mg/L的水溶液;GSE干預組，以100m

4、g/kg的劑量隔日灌胃;GSE與砷暴露聯(lián)合干預組，每日飲含亞砷酸鈉(NaAsO2)30mg/L的水溶液并以GSE100mg/kg的劑量隔日灌胃。12個月實驗期結束，末次染毒后次日，大鼠稱重，然后乙醚麻醉，抽取心臟血，制備血清樣本，檢測谷丙轉氨酶(ALT)、谷草轉氨酶(AST)和白蛋白的活性，作肝功能分析;切除肝臟，計算肝臟系數(shù);制備肝組織樣本，檢測谷胱甘肽(glutathione，GSH)、谷胱甘肽過氧化物酶(glutathionepe

5、roxidase，GSH-Px)、超氧化物歧化酶(superoxidedismutase，SOD)的活性、檢測組織ROS的水平以及脂質過氧化水平;運用WesternBlot方法檢測各組中NADPH氧化酶亞基Nox2、Nox4和p47phox蛋白表達水平。采用統(tǒng)計軟件SPSS12.0，對所得數(shù)據采用單因素方差分析，各組間的比較采用SNK-q檢驗，檢驗水準定為0.05。
　　 結果:
　　 與對照組相比，砷暴露組的肝臟系數(shù)升

6、高(q=18.91，P＜0.05);ALT和AST水平升高，白蛋白水平降低（q值分別為43.61，27.13，12.52，P均＜0.05），肝功能明顯受損;GSH、SOD和GSH-Px的活性降低（q值分別為91.96，75.24，39.88，P均＜0.05），組織中ROS與MDA水平升高（q值分別為36.79，47.53，P均＜0.05）;NADPH氧化酶亞基Nox2、Nox4、p47phox蛋白表達水平升高;而與砷暴露組相比，GSE聯(lián)