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文檔簡介
1、對(duì)羥基苯乙酰胺是合成阿替諾爾的重要中間體。阿替諾爾是一種新型的β-腎上腺素能受體阻滯劑,對(duì)心臟的β受體有選擇的阻滯作用,臨床上具有顯著的長效降壓和減慢心率的效果。本文采用微生物催化技術(shù),對(duì)生物轉(zhuǎn)化對(duì)羥基苯乙腈制備對(duì)羥基苯乙酰胺的微生物菌種篩選、培養(yǎng)和水合酶產(chǎn)酶條件、靜息細(xì)胞生物轉(zhuǎn)化工藝進(jìn)行了研究,為羥基苯乙酰胺的生物技術(shù)生產(chǎn)提供了一定的基礎(chǔ)。 本文篩選得到了7株有對(duì)羥基苯乙腈水解酶活力的菌株,對(duì)菌株E10a的形態(tài)、生理生化特性進(jìn)
2、行了鑒定,結(jié)合16srDNA全序列測(cè)定,確認(rèn)該菌株為赤紅球菌,命明RhodococcusruberE10a,Genebankaccessionno.DQ468352。對(duì)菌株RhodococcusruberE10a的培養(yǎng)和產(chǎn)酶條件進(jìn)行了考察,研究發(fā)現(xiàn)RhodococcusruberE10a菌株在發(fā)酵培養(yǎng)中加入各種誘導(dǎo)劑,其培養(yǎng)得到的菌體酶活并沒有顯著的提高;以酵母膏和麥芽糖分別作為氮源和碳源,有利于菌株的生長,其菌株的酶活力高;Co2+、
3、Zn2+對(duì)該腈水合酶有明顯的激活作用,而Cu2+存在下酶活力降低,同時(shí)通過試驗(yàn)證明該酶為Co型腈水合酶。 本論文在較優(yōu)的發(fā)酵條件下,制備收集E10a(Rhodococcusrubber)菌體,對(duì)其催化轉(zhuǎn)化工藝條件進(jìn)行了研究,結(jié)果表明,E10a靜息細(xì)胞水合PHN最適pH范圍6.0~7.0,最佳緩沖體系為NaH2PO4-Na2HPO4緩沖體系;底物濃度高于1.0%(w/v)時(shí),對(duì)該酶起到抑制作用,當(dāng)?shù)孜餄舛冗_(dá)到2.0%時(shí),E10a靜
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