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文檔簡介
1、背景:
心臟功能不僅依賴于正常的心肌細(xì)胞,而且依賴于正常的心肌間質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能。作為心肌間質(zhì)的重要成份,彈性纖維賦予了心肌良好的彈性,其構(gòu)象和比例的改變直接影響心肌功能。目前對心肌間質(zhì)的研究主要集中在膠原纖維,有關(guān)彈性纖維在心肌的分布結(jié)構(gòu)及生理和病理功能研究很少。高血壓病可導(dǎo)致心臟間質(zhì)結(jié)構(gòu)的破壞和重構(gòu),但彈性纖維在高血壓狀態(tài)下是如何分布的,目前尚不明了。
目的:
研究正常大鼠和高血壓大鼠心肌彈性纖維的形態(tài)差異
2、,為進(jìn)一步探討心肌彈性纖維的生理和病理機(jī)理和高血壓病的治療奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
方法:
1.建立高血壓大鼠模型制作:按照Rossi的方法復(fù)制高血壓大鼠模型,每日大鼠清醒后,一氧化氮合酶抑制劑NG-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAMAE)6mg/kg.d連續(xù)灌胃給藥3周,以尾壓穩(wěn)定大于150mmHg為制備成功標(biāo)準(zhǔn)。
2.于高血壓大鼠模型制備成功后第21天取材。取正常成年SD大鼠及成年高血壓SD大鼠各10只,取心肌組織
3、。采用免疫組織化學(xué)方法觀察彈性蛋白的表達(dá)部位,利用圖像分析系統(tǒng)對彈性蛋白進(jìn)行定量分析,采用單因素方差分析,分析彈性纖維在各組的比例關(guān)系。
3.采用Western blotting方法檢測正常組及高血壓組大鼠心肌的彈性蛋白含量,并對上述二組進(jìn)行對比分析。
結(jié)果:
1.彈性纖維免疫組化顯色在光鏡下呈棕褐色。彈性纖維廣泛分布在心臟的細(xì)胞間質(zhì)中,縱橫交錯(cuò)緊密包繞心肌細(xì)胞。在心臟外膜和內(nèi)膜以及心血管壁等處彈性纖維相對
4、豐富。鏡下可見發(fā)絲狀排列的纖維絲。高血壓組大鼠心血管壁、內(nèi)膜彈性纖維數(shù)量較正常成年大鼠減少,兩者之間彈性纖維表達(dá)存在顯著性差異(P<0.05)。
2.Western blotting結(jié)果:彈性蛋白在正常及高血壓大鼠心肌中均呈陽性表達(dá),但高血壓大鼠彈性蛋白較正常大鼠有減少趨勢,與免疫組織化學(xué)結(jié)果基本一致。
結(jié)論:
彈性纖維在SD大鼠心臟各部位細(xì)胞間質(zhì)廣泛分布。高血壓大鼠心血管壁、內(nèi)膜彈性纖維數(shù)量較正常大鼠減少
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