高血壓大鼠心肌組織中睪酮受體蛋白的表達(dá).pdf

1、背景：
　　隨著現(xiàn)代社會的高速發(fā)展，物質(zhì)生活的極大豐富和生活方式的改變導(dǎo)致一些疾病的發(fā)病率產(chǎn)生了新的變化，據(jù)世界衛(wèi)生組織預(yù)測，至2020年，非感染性疾病將占到死亡原因的近80％，其中占比最大的又是心血管疾病。中國心血管病報告2014中也提出2013年我國心血管病占農(nóng)村居民死亡的44.8%，占城市居民死亡原因的41.9%，平均每5例患者中就有2位是死于心血管疾病，已經(jīng)遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過了腫瘤、呼吸疾病及損傷/中毒等，與此同時我國心血管病患者也

2、已經(jīng)激增到2.9億，其中高血壓患者約2.7億?？傮w來說心血管疾病已經(jīng)成為我國高死亡率、高醫(yī)療風(fēng)險、高醫(yī)療費用的第一大慢性疾病。對其發(fā)病機(jī)制的研究不僅能夠幫助我們進(jìn)一步選擇最適合的診療方案，提高廣大患者的生活質(zhì)量，還能針對性的展開預(yù)防工作，產(chǎn)生巨大的社會效益。
　　心臟重構(gòu)是慢性心臟損傷的重要過程，在高血壓、冠心病、心力衰竭、心臟瓣膜病等、心律失常等多種心血管疾病的發(fā)生發(fā)展過程中也發(fā)揮著重要作用，甚至可以說心臟重構(gòu)是各種心臟疾病的發(fā)

3、病基礎(chǔ)，也是不可避免的病理階段。心臟重構(gòu)是心臟對各種刺激產(chǎn)生的適應(yīng)性改變，總體包含結(jié)構(gòu)重構(gòu)和電重構(gòu)兩個方面，結(jié)構(gòu)重構(gòu)主要表現(xiàn)為心肌細(xì)胞肥大、膠原纖維細(xì)胞增生以及組織壞死和凋亡導(dǎo)致的心肌細(xì)胞減少，形態(tài)學(xué)上表現(xiàn)為心室體積增大和心室形態(tài)的變化；電重構(gòu)則主要表現(xiàn)為細(xì)胞膜表面各種離子通道的改變、細(xì)胞間連接蛋白以及縫隙連接的分布改變，通常會導(dǎo)致靜息膜電位和動作電位時程改變，引起心肌電活動的不均一性，臨床上則表現(xiàn)為各種類型的心律失常。心肌細(xì)胞是心臟的

4、功能細(xì)胞，生理條件下接受心臟神經(jīng)元的刺激產(chǎn)生規(guī)律性的收縮、舒張，完成泵血功能，為機(jī)體各器官新陳代謝提供必需的氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)，在病理因素刺激下發(fā)生代償性肥大以維持泵血功能，失代償時終發(fā)展至凋亡、壞死。心肌成纖維細(xì)胞在維持心臟正常結(jié)構(gòu)和功能上起重要作用，病理因素作用下發(fā)生增殖，膠原合成增加，并過度沉積，導(dǎo)致心肌纖維化。由此可見心臟重構(gòu)是多種心血管疾病發(fā)生、發(fā)展及死亡的獨立危險因素，對其發(fā)病機(jī)制及藥物干預(yù)研究意義重大。
　　近年來，心肌

5、重構(gòu)的機(jī)制及防治研究是心血管領(lǐng)域的研究熱點之一。眾多的實驗結(jié)果證實：心室壁應(yīng)力增高的機(jī)械信號、RAS系統(tǒng)過渡激活、內(nèi)源性交感功能亢進(jìn)、氧化應(yīng)激等因素在心肌重構(gòu)的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮重要作用。這些信號通過肌膜通道和微管系統(tǒng)環(huán)磷酸腺苷的傳遞，抵達(dá)細(xì)胞核的DNA后引起基因表達(dá)的改變。心肌細(xì)胞的蛋白合成加速，膠原蛋白合成超過分解[2]。針對于上述靶點的阻斷藥物及機(jī)制研究成果應(yīng)用于臨床并取得了巨大的心血管收益。由于心肌重構(gòu)的成因是多因素的，日后的研究

6、趨勢將從對老靶點的探討轉(zhuǎn)變?yōu)閷π掳悬c的尋找，進(jìn)而對其阻斷措施進(jìn)行研究，從而獲取更全面的心肌血管保護(hù)效應(yīng)。
　　睪酮是人體最重要的性激素，除了在維持機(jī)體生長發(fā)育、性欲、免疫功能等方面發(fā)揮重要作用以外，還對脂代謝、糖代謝、炎癥反應(yīng)、血細(xì)胞的生成有一定的影響，目前廣泛應(yīng)用于男性性腺功能減退、骨髓造血功能障礙等疾病[3]。1990年Zumoffb等人的研究發(fā)現(xiàn)睪酮對心血管系統(tǒng)也有影響，之后此方面研究逐漸增多，但其具體的生物學(xué)效應(yīng)尚無定論—

7、—有研究表明睪酮與心血管不良事件相關(guān)；而另有研究證實睪酮對心血管系統(tǒng)有保護(hù)作用，如減輕動脈粥樣硬化、擴(kuò)張血管、保護(hù)AngⅡ誘導(dǎo)的血管重塑等。
　　睪酮的生物學(xué)效應(yīng)是通過睪酮受體實現(xiàn)的，二者之間存在著負(fù)反饋調(diào)節(jié)。低濃度的睪酮促進(jìn)睪酮受體蛋白的表達(dá)，超過一定濃度的睪酮則會抑制睪酮受體蛋白的表達(dá)。心臟內(nèi)睪酮受體主要定位于心房和心室肌細(xì)胞核。2005年國內(nèi)發(fā)現(xiàn)心臟神經(jīng)元中存在睪酮受體，此后陸續(xù)有相關(guān)研究報道，但仍多側(cè)重于睪酮受體在機(jī)體各部

8、位的分布，對于在病理狀態(tài)下，心肌組織中睪酮受體的動態(tài)變化、生物學(xué)意義，以及其分子機(jī)制，目前未見相關(guān)報道。
　　絲裂原活化蛋白酶原（Mitogen-activatedproteinkinaseMAPKs）是一種生長信號調(diào)節(jié)蛋白，主要分布在胞漿，在細(xì)胞內(nèi)，在細(xì)胞增殖、分化、轉(zhuǎn)化及凋亡等過程中起著重要的作用。哺乳類動物的MAPKs信號途徑主要有ERK/JNK/P38三條信號通路，其激活過程均為酶促級聯(lián)反應(yīng)。絲裂原活化蛋白酶原可以通過多種

9、途徑參與高血壓心肌重構(gòu)過程，而絲裂原活化蛋白酶原磷酸酶1（MKP-1），作為MAPKs滅活的重要途徑，對于保持MAPKs的活性動態(tài)平衡發(fā)揮著重要作用，多項研究表明在心肌重構(gòu)過程中一方面伴隨著MAPKs的過度激活，另一方面伴隨著MKP-1的滅活障礙。
　　目的：
　　觀察在高血壓心肌重構(gòu)過程中睪酮受體蛋白表達(dá)水平的改變并探討其機(jī)制。
　　方法：
　　28日齡wistard大鼠30只，適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后隨機(jī)分為3組（每

10、組10只）：1.對照組（n=10）；2.假手術(shù)組（n=10）；3.模型組（n=10）。模型組以“兩腎一夾”法結(jié)扎左腎動脈，假手術(shù)組只開腹不結(jié)扎左腎動脈，對照組不作處理。定期以鼠尾無創(chuàng)測壓系統(tǒng)測定大鼠動脈收縮壓，HE染色觀察高血壓心肌的形態(tài)學(xué)變化，免疫組化法檢測睪酮受體蛋白及絲裂素活化蛋白激酶磷酸酶1（MKP-1）的表達(dá)水平變化并對其進(jìn)行相關(guān)性分析。
　　結(jié)果：
　　1.8周后模型組大鼠收縮壓較造模前明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義

11、（F組間=1211.779，F(xiàn)時間=1613.225,F交叉=1537.050，P均<0.001）,高血壓大鼠造模成功。正常組與假手術(shù)組大鼠血壓未見明顯變化，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。
　　2.8周后模型組大鼠左室質(zhì)量分?jǐn)?shù)較對照組及假手術(shù)組明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）,模型組心肌纖維排列紊亂，部分心肌纖維斷裂，心肌成不同程度肥大或變性，對照組及假手術(shù)組心肌組織排列整齊，未見明顯增生肥大、變性及壞死。
　

12、　3.模型組睪酮受體蛋白及絲裂素活化蛋白激酶磷酸酶1（MKP-1）蛋白表達(dá)水平較對照組及假手術(shù)組明顯降低，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），且二者存在相關(guān)性（P<0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.高血壓心肌重構(gòu)的過程中存在睪酮受體蛋白表達(dá)水平的下降，提示睪酮受體參與了高血壓心肌重構(gòu)的過程。
　　2.高血壓心肌重構(gòu)的過程中存在著MKP-1蛋白表達(dá)水平的下降，且與睪酮受體蛋白下降呈高度正相關(guān)，提示睪酮受體參與心肌重構(gòu)的機(jī)