2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:納米級藥物可能產生特殊的惡性生物學效應,本試驗通過與ABZ原料做對比,對采用優(yōu)化工藝制備的納米級 ABZ微粉進行表征,并初步分析納米級 ABZ微粉體外對HL-7702細胞的生物毒性及氧化損傷作用,以初步評價ABZ納米微粉的安全性。
  方法:1、與原料做對比,分別采用透射電鏡(TEM)、掃描電鏡(SEM)、激光粒度散射儀等對 ABZ納米微粉的表觀、粒度、電位、多分散指數(PDI)等進行表征。2、以粒徑和粒子分散狀態(tài)為參考指標

2、,采用掃描電鏡觀察 ABZ納米微粉在超純水、磷酸鹽(PBS)緩沖液、RMPI1640完全培養(yǎng)基、RMPI1640培養(yǎng)液、0.9%氯化鈉溶液5種分散介質中的分散狀態(tài),并檢測其粒徑,篩選適于ABZ細胞毒理學評價的最佳分散介質。同時采用超聲、超聲與細胞破碎超聲組合兩種分散方式分別分散ABZ納米微粉,篩選最佳超聲分散方式。并在此基礎上進一步考察原料超聲時間為5~60 min時ABZ的粒徑變化趨勢,以確定最佳超聲時間。3、以人正常HL-7702肝

3、細胞為研究對象,采用MTT法初步評價不同濃度ABZ納米微粉對細胞產生的毒性。4、采用生物化學方法(酶聯(lián)免疫分析法)檢測納米級ABZ對HL-7702肝細胞中總蛋白(TP)、谷胱甘肽氧化酶(GSH-px)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)等生化指標的影響,考察其氧化應激作用。
  結果:1、ABZ原料粉末呈不規(guī)則片狀,粒度不均;ABZ納米微粉呈不規(guī)則粒狀,分布均勻。ABZ原料的平均粒徑為1650±7.1 nm,電位為5.0±

4、2.20 mV,PDI為0.641±0.199。納米微粉的平均粒徑為370±2.13 nm,電位為-18.0±3.25 mV,PDI為0.355±0.127。經優(yōu)化的納米沉淀技術獲得了形貌較好,粒徑較小的ABZ納米微粉。2、ABZ納米微粉在5種分散介質中均發(fā)生了不同程度的團聚,與基礎值比較粒徑普遍增大。但ABZ在PBS緩沖液、0.9%氯化鈉溶液和超純水中聚合程度相對輕微,粒徑增大幅度較小,結合細胞對生長環(huán)境的特殊要求選擇分散介質為PBS

5、緩沖液。同時,阿苯達唑納米懸浮液采用超聲與細胞破碎超聲組合的分散方式,可較好地維持納米微粉的表征特點,最佳超聲時間為30 min。3、細胞染毒24h和48h后,各濃度ABZ原料的RCG為84%-101%之間,各濃度納米ABZ的RCG為80%-101%之間,二者細胞毒性等級均為1級。72h,各濃度ABZ原料微粉RCG為77%-93%之間,納米ABZ的RCG為75%-90%之間,濃度為0.190mmol/ L的ABZ原料微粉處理組的細胞毒性

6、為2級,濃度為0.380mmol/ L、0.190mmol/ L的納米微粉處理組的細胞毒性為2級,其余均為1級。ABZ原料與納米微粉在毒性效應上仍屬于同一水平。4、與對照組相比,細胞染毒72h后,ABZ原料及納米微粉各濃度干預組細胞的蛋白含量并未發(fā)生明顯變化;同時,各濃度ABZ原料干預細胞后,其 GSH-px、SOD、MDA等的含量也未發(fā)生顯著性變化(P>0.05)。高濃度納米微粉組(0.380 mmol/ L、0.190mmol/ L

7、)對細胞中GSH-px、SOD、MDA的含量具有顯著影響(P﹤0.05)。
  結論:1、采用優(yōu)化的微粉化技術獲得了形貌較好、粒徑較小的阿苯達唑納米微粉。2、以PBS為分散介質,采用超聲與細胞破碎超聲的分散方法可有效抑制納米微粉懸浮液的團聚,較好的維持了納米微粉的表征特點,適宜于ABZ納米微粉的細胞毒性研究。3、兩種粉末體外對 HL-7702細胞的毒性作用均較小,ABZ原料與獲得粒徑范圍的納米微粉在毒性效應上位于同一水平。4、阿苯

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