乳酸菌黏附小鼠派伊爾結(jié)介導(dǎo)免疫調(diào)節(jié)作用研究.pdf

1、乳酸菌參與腸道免疫穩(wěn)態(tài)的維持，外源給予乳酸菌可預(yù)防過(guò)敏和炎癥等免疫失衡疾病，研究乳酸菌黏附腸道派伊爾結(jié)(PP)、M細(xì)胞與介導(dǎo)免疫調(diào)節(jié)作用的機(jī)制，對(duì)促進(jìn)乳酸菌制劑開(kāi)發(fā)以及科學(xué)使用有重要意義。
　　 利用熒光定量法結(jié)合顯微觀(guān)察法研究9株乳酸菌黏附小鼠派伊爾結(jié)(PP)及非派伊爾結(jié)的性質(zhì)，測(cè)定細(xì)菌表面性質(zhì)(疏水性，細(xì)菌表面自由能，膜電位)，分析其與黏附性之間的關(guān)系。合成甘露糖、巖藻糖(PP濾泡相關(guān)上皮(follicle-associat

2、ed epithelium，F(xiàn)AE)表達(dá)豐富)等糖基化牛血清白蛋，測(cè)定細(xì)菌結(jié)合糖基化牛血清白蛋白的性質(zhì)，分析凝集素樣作用與黏附性之間的關(guān)系。同時(shí)，測(cè)定不同乳酸菌誘導(dǎo)PP組織塊釋放細(xì)胞因子的活性。為探討乳酸菌黏附性與免疫調(diào)節(jié)作用之間的關(guān)系，研究了黏附性不同、誘導(dǎo)IL-12p70活性相同的四株乳酸菌緩解卵清蛋白(OVA)誘導(dǎo)過(guò)敏反應(yīng)的能力。此外，選擇黏附作用相近，誘導(dǎo)IL-10作用不同的三株乳酸菌，研究其抗葡聚糖硫酸鈉(DSS)誘導(dǎo)急性腸炎

3、的效率，探討乳酸菌免疫調(diào)節(jié)特性與體內(nèi)免疫調(diào)節(jié)作用效率的關(guān)系。
　　 試驗(yàn)結(jié)果：乳酸菌的表面自由能是介導(dǎo)非特異性黏附的重要作用力來(lái)源(r=-0.70148，P=0.03521)，而表面疏水性、帶電性與其黏附PP無(wú)顯著相關(guān)。乳酸菌黏附PP能力顯著強(qiáng)于黏附非PP(回腸)，但二者顯著相關(guān)(r=0.81425，P=0.00414)。糖基化牛血清白蛋白的結(jié)合性質(zhì)表明，L.acidophilus Fn022和L.rhamnosus GG具有很

4、強(qiáng)的巖藻糖黏附性，顯示具有靶向M細(xì)胞的潛性。激光共聚焦顯微觀(guān)察顯示，乳酸菌在體外主要粘附于PP的FAE，且集中于荊豆凝集素(UEA-1)可標(biāo)記部位(含M細(xì)胞)。測(cè)定乳酸菌誘導(dǎo)PP組織塊釋放IL-10、IL-12p70、TNF-α的特性，選用Th1免疫誘導(dǎo)型(IL-12p70誘導(dǎo)型)、黏附派伊爾結(jié)性依次降低的四株菌：L.rhamnosus GG、L.acidophilusFn037、L.plantarum Fn008和L.casei Fn

5、012，給OVA致敏小鼠分別灌胃21d，乳酸菌可上調(diào)脾臟Th1型細(xì)胞因子(IL-12 p70)與Th2型細(xì)胞因子(IL-4)比值，提高sIgA和腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能，其效率隨黏附性增強(qiáng)而增強(qiáng)。此外，選用黏附PP的性質(zhì)相似的抗炎型(IL-10誘導(dǎo)型)乳酸菌L.sakei Fn034、L.acidophilus Fn037、和L.rhamnosus GG，分別菌懸液飲用7d，用DSS誘導(dǎo)急性腸炎(7d)，乳酸菌可顯著抑制DSS誘導(dǎo)引起小鼠體