怡爾康對小鼠的抑瘤作用與免疫調(diào)節(jié)作用.pdf

1、目的：觀察怡爾康對小鼠移植性實體瘤的抑制作用及免疫調(diào)節(jié)作用。 方法：1通過對小鼠接種S180腫瘤細胞造成移植性實體瘤模型，測定怡爾康對荷瘤小鼠腫瘤的抑制率。小鼠50只，按體重隨機分為5組：荷瘤對照組，環(huán)磷酰胺對照組，怡爾康高劑量組(480mg/kg)、中劑量組(240mg/kg)、低劑量組(120mg/kg)劑量組，每組10只。在小鼠接種腫瘤細胞24小時后，對小鼠連續(xù)灌胃給藥10天。末次給藥后1小時，頸椎脫臼處死小鼠，完整剝?nèi)∧[

2、瘤并稱取瘤重。 2小鼠50只，按體重隨機分為5組：荷瘤小鼠對照組，環(huán)磷酰胺對照組，怡爾康高劑量組(480mg/kg)、中劑量組(240mg/kg)、低劑量組(120mg/kg)，每組10只。對小鼠連續(xù)給藥24天，在開始給藥第14天，對小鼠接種S180腫瘤細胞造成移植性實體瘤模型，末次給藥后1小時，頸椎脫臼處死小鼠，完整剝?nèi)∧[瘤并稱取瘤重，測定怡爾康對荷瘤小鼠腫瘤的抑制率。 3ConA誘導的小鼠淋巴細胞轉(zhuǎn)化實驗(MTT法)

3、實驗小鼠40只，按體重隨機分為5組：正常對照組，環(huán)磷酰胺對照組，怡爾康高劑量組(480mg/kg)、中劑量組(240mg/kg)和低劑量組(120mg/kg)，每組8只。每天1次，連續(xù)給藥14天，末次給藥后1小時，頸椎脫臼處死小鼠，完整剝?nèi)⌒∈笃⑴K，制備脾細胞懸液，用MTT法測定淋巴細胞的增殖能力。 4通過小鼠碳廓清實驗，考察怡爾康對小鼠非特異性免疫的影響。實驗小鼠50只，按體重隨機分為5組：正常對照組，環(huán)磷酰胺對照組，怡爾康高

4、劑量組(480mg/kg)、中劑量組(240mg/kg)、低劑量組(120mg/kg)，每組10只。每天1次，連續(xù)給藥14天，末次給藥后1小時，小鼠尾靜脈注射用生理鹽水稀釋后的印度墨汁，注入墨汁后2、10分鐘，分別從內(nèi)眥靜脈叢取血20μl，并將其加到2mLNa2CO3溶液中。用分光光度計在600nm波長處測光密度值(OD)，以Na2CO3溶液作空白對照；將小鼠處死，取肝臟和脾臟并稱重，計算吞噬指數(shù)。 5血清溶血素的測定——半數(shù)溶

5、血值(HC50)測定實驗小鼠50只，按體重隨機分為5組：正常對照組，環(huán)磷酰胺對照組，怡爾康高劑量組(480mg/kg)、中劑量組(240mg/kg)、低劑量組(120mg/kg)，每組10只。每天1次，連續(xù)給藥14天，在開始給藥第9天，對小鼠腹腔注射2％(v/v)綿羊紅細胞(SRBC)，末次給藥后1小時，將小鼠處死，取血并分離血清，測定HC50。 6NK細胞活性測定(乳酸脫氫酶測定法)。 實驗小鼠40只，按體重隨機分為5

6、組：正常對照組，環(huán)磷酰胺對照組，怡爾康高劑量組(480mg/kg)、中劑量組(240mg/kg)、低劑量組(120mg/kg)，每組8只。每天1次，連續(xù)給藥14天，末次給藥后1小時，頸椎脫臼處死小鼠，完整剝?nèi)⌒∈笃⑴K，制備脾細胞懸液，靶細胞(YAC-1)傳代，以50∶1的效靶比，用乳酸脫氫酶測定法測定怡爾康對小鼠NK細胞活性的影響。 實驗結束，采用SAS6.12統(tǒng)計軟件對各實驗的相關數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。 結果：1實驗結果顯

7、示，荷瘤對照組小鼠的平均瘤重為1.55±0.28g、環(huán)磷酰胺組小鼠的平均瘤重為0.47±0.19g(P＜0.01)，抑瘤率為69.68％；怡爾康低劑量組小鼠的平均瘤重為1.28±0.39g(P＞0.05)，抑瘤率為17.42％；怡爾康中劑量組小鼠的平均瘤重為1.24±0.40g(P＞0.05)，抑瘤率為18.71％；怡爾康高劑量組小鼠的平均瘤重為1.05±0.23g(P＜0.05)，抑瘤率為32.26％。 2小鼠連續(xù)灌胃給藥24

8、天，則怡爾康的抗腫瘤作用明顯增強。荷瘤對照組小鼠的平均瘤重為1.61±0.33g，環(huán)磷酰胺組小鼠的平均瘤重為0.37±0.27g(P＜0.01)，抑瘤率為77.02％；怡爾康低劑量組小鼠的平均瘤重為1.14±0.47g(P＜0.05)，抑瘤率為29.19％；怡爾康中劑量組小鼠的平均瘤重為1.06±0.32g(P＜0.05)，抑瘤率為31.61％；怡爾康高劑量組小鼠的平均瘤重為0.56±0.21g(P＜0.01)，抑瘤率為65.22％。

9、 3ConA誘導的小鼠淋巴細胞轉(zhuǎn)化實驗：結果顯示，環(huán)磷酰胺組小鼠淋巴細胞增殖能力(0.399±0.038)顯著低于對照組(0.447±0.096)，而怡爾康中劑量組(240mg/kg)小鼠淋巴細胞增殖能力(0.582±0.090)則顯著高于對照組(P＜0.05)。 4小鼠碳廓清實驗結果顯示，環(huán)磷酰胺組小鼠的吞噬速率(k)和吞噬指數(shù)(a)，分別為0.0168±0.0015、3.68±0.66，與正常對照組的數(shù)據(jù)(0.0211

10、±0.0038、4.74±0.68)相比，呈顯著降低(P＜0.05)，而怡爾康中劑量組(240mg/kg)、高劑量組(480mg/kg)小鼠吞噬速率和吞噬指數(shù)分別為0.0317±0.0087和5.59±0.72、0.0297±0.0059和5.78±1.21，比正常對照組顯著增加(P＜0.05)。 從實驗結果還可看到，與正常對照組相比，環(huán)磷酰胺組小鼠的體重和胸腺系數(shù)均有顯著的降低(P＜0.05)，胸腺萎縮。怡爾康各劑量組小鼠的體

11、重、脾臟系數(shù)、胸腺系數(shù)均與正常對照組相比，無顯著性差別。 5半數(shù)溶血值(HC50)測定：正常對照組、環(huán)磷酰胺組以及怡爾康高、中、低劑量組小鼠的半數(shù)溶血值(HC50)分別為130.56±20.55、115.23±19.67、135.37±21.18、126.32±20.15和129.54±15.12。與正常對照組相比，除環(huán)磷酰胺組的半數(shù)溶血值顯著降低(P＜0.05)，其余各組無顯著性差異。 6NK細胞活性測定：從實驗數(shù)據(jù)我